[發明專利]含有Fc的蛋白的純化方法

在審

• 申請號: 202210979746.6
• 申請日: 2017-07-21
• 公開（公告）號: CN115925780A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: J.K.卡烏亞
• 申請（專利權）人: 美國安進公司
• 主分類號: C07K1/22
• 分類號: C07K1/22;C07K1/34;C07K16/00;B01D15/34;B01D15/38;B01D15/42
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 羅文鋒;彭昶

1.?一種用于將抗體與其半抗體形式分離的方法，所述方法包括：

使用流動相使包含抗體及其半抗體形式的溶液與凝膠過濾基質接觸，所述流動相具有約6.5至約7.5的pH，并且包含離液劑、糖醇、非極性氨基酸、和堿性氨基酸；和

從所述凝膠過濾基質中收集洗脫級分，其中所述抗體在一組洗脫級分中洗脫，并且所述其半抗體形式在另一組洗脫級分中洗脫，從而將所述抗體與所述其半抗體形式分離。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述離液劑是尿素、氯化胍、硫氰酸鈉、硫氰酸鉀或硫氰酸銨。

3.如權利要求2所述的方法，其中所述離液劑是尿素。

4.?如權利要求3所述的方法，其中所述尿素以約2?M至約4.5?M的濃度存在。

5.?如權利要求4所述的方法，其中所述尿素以約4?M的濃度存在。

6.如權利要求1所述的方法，其中所述糖醇是山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、或甘油。

7.如權利要求1所述的方法，其中所述糖醇是山梨糖醇。

8.?如權利要求1所述的方法，其中所述糖醇以約1?M至約4.5?M的濃度存在。

9.?如權利要求8所述的方法，其中所述糖醇以約2?M至約2.5?M的濃度存在。

10.如權利要求1所述的方法，其中所述堿性氨基酸是組氨酸、賴氨酸、鳥氨酸、或精氨酸。

11.如權利要求10所述的方法，其中所述堿性氨基酸是精氨酸。

12.如權利要求1所述的方法，其中所述非極性氨基酸是丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、或纈氨酸。

13.如權利要求12所述的方法，其中所述非極性氨基酸是脯氨酸。

14.?如權利要求1所述的方法，其中所述堿性氨基酸和/或所述非極性氨基酸以約0.25M至約1?M的濃度存在。

15.?如權利要求1所述的方法，其中所述堿性氨基酸和/或所述非極性氨基酸以約0.5M的濃度存在。

16.如權利要求1所述的方法，其中所述流動相進一步包含鹽。

17.?如權利要求16所述的方法，其中所述鹽以約0.25?M至約0.8?M的濃度存在。

18.如權利要求16所述的方法，其中所述鹽是氯化鈉。

19.?如權利要求18所述的方法，其中所述流動相包含約2?M至約4.5?M尿素、約1?M至約4.5?M山梨糖醇、約0.25?M至約1?M精氨酸、約0.25?M至約1?M脯氨酸、和0.25?M至約0.8?M氯化鈉。

20.?如權利要求19所述的方法，其中所述流動相包含約4?M尿素、約2.2?M山梨糖醇、約0.5?M精氨酸、約0.5?M脯氨酸、和約0.75?M氯化鈉。

21.如權利要求1所述的方法，其中所述流動相具有約7.0至約7.4的pH。

22.?如權利要求1所述的方法，其中將所述流動相以約0.01?ml/min至約0.2?ml/min的流速應用于所述凝膠過濾基質。