[發(fā)明專利]眼內(nèi)液細(xì)菌的檢測方法、探針組合物和試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210974657.2 | 申請日： | 2022-08-15 |
| 公開（公告）號： | CN115747354A | 公開（公告）日： | 2023-03-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陶勇;陸成慧;鄧永杰 | 申請（專利權(quán)）人： | 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院;智德明創(chuàng)生物科技（無錫）有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/385;C12R1/46;C12R1/445;C12R1/22 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 張金銘 |
| 地址： | 100026 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 眼內(nèi)液 細(xì)菌 檢測 方法 探針 組合 試劑盒 | ||
1.用于檢測眼內(nèi)液細(xì)菌的探針組合物，其特征在于，包括如下探針組：
用于檢測銅綠假單胞菌的探針組，由序列如Seq_1所示探針PA-ecfX-F20、序列如Seq_2所示探針PA-ecfX-R24和序列如Seq_3所示探針PA-ecfX-P20組成；
用于檢測肺炎克雷伯菌的探針組，由序列如Seq_4所示探針Kpn-rcsA-F1、序列如Seq_5所示探針Kpn-rcsA-R2和序列如Seq_6所示探針Kpn-rcsA-P1組成；
用于檢測金黃色葡萄球菌的探針組，由序列如Seq_7所示探針SA-nuc-F2、序列如Seq_8所示探針SA-nuc-R1和序列如Seq_9所示探針SA-nuc-P1組成；
用于檢測釀膿鏈球菌的探針組，由序列如Seq_10所示探針Spy-DnaseB-F2、序列如Seq_11所示探針Spy-DnaseB-R1和序列如Seq_12所示探針Spy-DnaseB-P1組成；
探針PA-ecfX-P20、探針Kpn-rcsA-P1、探針SA-nuc-P1和探針Spy-DnaseB-P1分別獨(dú)立的修飾有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的探針組合物，其特征在于，還包括用于檢測內(nèi)參基因的探針組；
優(yōu)選地，所述用于檢測內(nèi)參基因的探針組由序列如Seq_13所示探針RP-F10、序列如Seq_14所示探針RP-R10和序列如Seq_15所示探針RP-P10組成；所述探針RP-P10修飾有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的探針組合物，其特征在于，所述熒光基團(tuán)選自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red或Cy5；
優(yōu)選地，所述猝滅基團(tuán)選自BHQ1、BHQ2或MGB。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的探針組合物，其特征在于，所述探針組合物包括探針組合物A和探針組合物B；
所述探針組合物A包括所述用于檢測銅綠假單胞菌的探針組、所述用于檢測肺炎克雷伯菌的探針組和用于檢測內(nèi)參基因的探針組；
所述探針組合物A中的探針PA-ecfX-P20、探針Kpn-rcsA-P1和探針RP-P10由互不相同的熒光基團(tuán)修飾；
所述探針組合物B包括所述用于檢測金黃色葡萄球菌的探針組、所述用于檢測釀膿鏈球菌和用于檢測內(nèi)參基因的探針組；
所述探針組合物B中的探針SA-nuc-P1、探針Spy-DnaseB-P1和探針RP-P10由互不相同的熒光基團(tuán)修飾；
優(yōu)選地，所述探針組合物A中：探針PA-ecfX-P20的5’端修飾FAM熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ1猝滅基團(tuán)；探針Kpn-rcsA-P1的5’端修飾VIC熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ1猝滅基團(tuán)；探針RP-P10的5’端修飾CY5熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ3猝滅基團(tuán)；
優(yōu)選地，所述探針組合物B中：探針SA-nuc-P1的5’端修飾FAM熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ1猝滅基團(tuán)；探針Spy-DnaseB-P1的5’端修飾VIC熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ1猝滅基團(tuán)；探針RP-P10的5’端修飾CY5熒光基團(tuán)，3’端修飾BHQ3猝滅基團(tuán)。
5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的探針組合物在如下(a)～(d)中的應(yīng)用：
(a)用于非診斷和治療目的的檢測銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌和釀膿鏈球菌中的一種或多種；
(b)用于制備檢測銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌和釀膿鏈球菌中的一種或多種的產(chǎn)品；
(c)用于制備檢測眼內(nèi)液細(xì)菌的產(chǎn)品；
(d)用于制備診斷眼部疾病的產(chǎn)品。
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