[發(fā)明專利]功能性DNA凝膠的制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210967656.5
• 申請日: 2022-08-12
• 公開（公告）號: CN116103277A
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梁興國;史婷婷;安然;侯玉穎
• 申請（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;G01N33/53;C08F220/56;C08F220/24
• 代理公司: 青島中天匯智知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37241
• 代理人: 韓麗萍

1.一種功能性DNA凝膠的制備方法，其特征在于，將功能性環(huán)狀DNA與凝膠單體溶液混合，并加入引發(fā)劑和促凝劑進行交聯(lián)聚合反應(yīng)，反應(yīng)過程中凝膠單體穿過所述功能性環(huán)狀DNA并聚合成為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，使功能性環(huán)狀DNA以懸掛固定的形式富集于凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)上，得到功能性DNA凝膠；所述功能性環(huán)狀DNA為含有功能性核酸序列的環(huán)狀DNA。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述環(huán)狀DNA的長度為59-177nt。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述功能性環(huán)狀DNA在室溫下保持簡單二級結(jié)構(gòu)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述凝膠單體溶液的濃度為8％-30％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述凝膠單體為丙烯酰胺類單體。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述丙烯酰胺類單體為丙烯酰胺和N，N二甲基丙烯酰胺，二者的質(zhì)量比為(25-33)：1。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述引發(fā)劑為過硫酸銨、偶氮二異丁腈、過氧化二苯甲酰、過氧化二異丙苯、偶氮二異庚腈中的一種或多種；所述促凝劑為四甲基乙二胺或3-二甲胺丙腈。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述功能性環(huán)狀DNA是采用如下方法制備的：首先設(shè)計三條的包含功能性核酸序列的DNA鏈，且分別設(shè)計不同序列的輔助DNA用于將三條DNA鏈連接成環(huán)；利用外切酶去除環(huán)狀DNA中混雜著的線性及雙鏈DNA；抽提醇沉，去除環(huán)狀DNA制備過程中的鎂離子和蛋白質(zhì)，得到純凈的環(huán)狀DNA。

9.權(quán)利要求1所述的功能性DNA凝膠在脫除或富集溶液中靶標(biāo)物質(zhì)方面的應(yīng)用，其特征在于，所述功能性DNA具備靶標(biāo)物質(zhì)結(jié)合作用，將所述功能性DNA凝膠浸入含有靶標(biāo)物質(zhì)的水溶液中，環(huán)狀DNA鏈上的功能性核酸序列特異性結(jié)合靶標(biāo)物質(zhì)；將吸附了靶標(biāo)物質(zhì)的凝膠從水溶液中分離出去。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用為脫除溶液中的重金屬離子、毒素、獸藥或農(nóng)藥，或者富集溶液中的小分子核酸。