[發明專利]一種好氧反硝化組合菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210966530.6
• 申請日: 2022-08-12
• 公開（公告）號: CN115386517A
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發明（設計）人: 洪培;疏義林;吳海龍;汪建中
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C12R1/38
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 陳偉

1.一種門多薩假單胞菌IHB602，其特征在于：所述的門多薩假單胞菌IHB602于2022年4月25日保藏于中國典型培養物保藏中心，其地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號，武漢大學，保藏編號為CCTCC No.M2022494。

2.一種甲基桿菌DC-1，其特征在于：所述的甲基桿菌DC-1于2022年3月9日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏單位地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號，武漢大學，保藏編號為CCTCC No.M2022232。

3.一種施氏假單胞菌IHB618，其特征在于：所述的施氏假單胞菌IHB618于2022年4月25日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏單位地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號，武漢大學，保藏編號為CCTCC No.M2022493。

4.權利要求1所述的門多薩假單胞菌IHB602、權利要求2所述的甲基桿菌DC-1和/或權利要求3所述的施氏假單胞菌IHB618在制備廢水處理好氧反硝化組合菌劑中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述的門多薩假單胞菌IHB602、甲基桿菌DC-1和施氏假單胞菌IHB618的數量比為1:0.5-2:0.5-2，優選為1:1:1。

6.一種好氧反硝化組合菌劑，其特征在于：所述的組合菌劑包括權利要求1所述的門多薩假單胞菌IHB602、權利要求2所述的甲基桿菌DC-1和/或權利要求3所述的施氏假單胞菌IHB618。

7.根據權利要求6所述的組合菌劑，其特征在于：所述的門多薩假單胞菌IHB602、甲基桿菌DC-1和施氏假單胞菌IHB618的數量比為1:0.5-2:0.5-2，優選為1:1:1。

8.一種好氧反硝化組合菌劑的制備方法，其特征在于：所述的方法包括以下步驟：

(1)將菌株置于DTM培養基中生長，定期取樣，測定OD₆₀₀值，并根據時間和OD₆₀₀值的關系繪制生長曲線圖，在對數后期生長階段收獲菌液，離心，去除上清液，得到濃縮菌株；

(2)將濃縮菌株重懸于共聚集緩沖液中洗滌，得到含有菌株的懸浮液A；

(3)調節懸浮液A的吸光度值至OD₆₀₀＝1，得到懸浮液B；

(4)按照步驟(1)-(3)的方法，分別制得門多薩假單胞菌IHB602、甲基桿菌DC-1和施氏假單胞菌IHB618的懸浮液；

(5)將等體積的門多薩假單胞菌IHB602、甲基桿菌DC-1和施氏假單胞菌IHB618的懸浮液混合，并記錄OD₆₀₀值；使用聚集指數計算共聚集的百分比，獲得最優共聚集組合菌劑；

所述共聚集指數的公式為：

其中，At為靜置時間為t小時的OD₆₀₀數值；A0為靜置時間為0時的OD₆₀₀數值。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述共聚集緩沖液為CaCl₂、NaCl、Tris和MgCl₂的混合溶液。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述混合溶液中各物質的濃度分別為：1mM CaCl₂，150mM NaCl，10mM Tris，1mM MgCl₂。

11.權利要求1所述的門多薩假單胞菌IHB602、權利要求2所述的甲基桿菌DC-1、權利要求3所述的施氏假單胞菌IHB618和/或權利要求6所述的組合菌劑在廢水處理中的應用。

12.根據權利要求11所述的應用，其特征在于：所述的應用發生于序批式生物膜反應器中。

13.一種廢水處理的方法，其特征在于：所述的方法包括以下步驟：

(1)在生物膜反應器中添加門多薩假單胞菌IHB602、甲基桿菌DC-1、施氏假單胞菌IHB618和/或好氧反硝化組合菌劑，測量并分析生物膜的厚度和含量；

(2)通入廢水，進行廢水處理；

(3)在反應器穩定運行時，檢測高效共聚集脫氮菌劑的豐度。