[發(fā)明專利]藤倉鐮刀菌及其發(fā)酵生產(chǎn)赤霉素A4+7

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210964298.2
• 申請日: 2022-08-11
• 公開（公告）號: CN115466685A
• 公開（公告）日: 2022-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陸建衛(wèi);吳燁飛;沈波;朱建新;馮佩杰;陸春鋒;常宏;俞海燕
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P27/00;C12R1/77
• 代理公司: 嘉興熠向知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 33489
• 代理人: 周雪峰

本申請涉及微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藤倉鐮刀菌及其赤霉素A4+7的方法及運用，其中本申請的藤倉鐮刀菌于2022年5月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC NO.40179，菌種名為QJ47?9。本申請中的藤倉鐮刀菌經(jīng)市售藤倉鐮刀菌誘導(dǎo)得到，其具有更高的發(fā)酵水平，發(fā)酵溫度高于市售藤倉鐮刀菌，且發(fā)酵周期縮短，相較于現(xiàn)有的生產(chǎn)菌中具有明顯的優(yōu)勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藤倉鐮刀菌及其發(fā)酵生產(chǎn)赤霉素A₄₊₇的方法及運用。

背景技術(shù)

赤霉素是一類內(nèi)源性植物調(diào)節(jié)物質(zhì)，在各種作物種均有存在。赤霉素具有雙萜結(jié)構(gòu)，具有較多的種類。不同的赤霉素之間的差別主要在于雙鍵和羥基為位置和數(shù)目，其作為植物激素，可以起到促進(jìn)植物生長、防止器官脫落、促進(jìn)麥芽糖轉(zhuǎn)化、促進(jìn)細(xì)胞生長等諸多作用，常被用做植物生長調(diào)節(jié)劑，起到促進(jìn)種子萌發(fā)、調(diào)節(jié)植物株高和器官大小、刺激植物開花、調(diào)節(jié)果實大小等作用。

目前，市售的赤霉素主要為赤霉素A₃和赤霉素A₄₊₇，其制備方法主要為微生物發(fā)酵法。該方法一般通過菌種在一定溫度下發(fā)酵得到，由于目前，市面上的赤霉素發(fā)酵工藝一般的使用溫度均為30℃。由于發(fā)酵制備赤霉素的過程中，赤霉素生產(chǎn)菌會釋放出大量的熱量，因此需要采用大量冷卻水，以控制反應(yīng)體系的溫度，進(jìn)而保證赤霉素生產(chǎn)菌活性，這種方法帶來了大量冷卻水的使用，造成了資源的浪費和生產(chǎn)成本的升高。

發(fā)明內(nèi)容

本申請涉及藤倉鐮刀菌，該藤倉鐮刀菌可以在32℃以上的環(huán)境中發(fā)酵并以較高的產(chǎn)量制備赤霉素₄₊₇，具有良好的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。

本申請涉及的藤倉鐮刀菌經(jīng)原赤霉素A₄₊₇生產(chǎn)菌誘變得到，其菌種名為QJ47-9，于2022年5月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCCNO.40179，拉丁名為Fusarium fujikuroi。

本申請還涉及上述藤倉鐮刀菌在生產(chǎn)赤霉素₄₊₇中的運用。

本申請涉及通過以上藤倉鐮刀菌發(fā)酵制備赤霉素_A4+7中方法，其中，發(fā)酵溫度不低于30℃，優(yōu)選不低于32℃。發(fā)酵時間不少于6天，優(yōu)選為6天。

本申請中，制備赤霉素A₄₊₇的方法具體包括如下步驟：

S1、配置種子培養(yǎng)基，加入如權(quán)利要求1中所述的藤倉鐮刀菌菌種，培養(yǎng)得到種子液；

S2、將種子液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵培養(yǎng)基中，對種子液進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵液。

在步驟S2中，發(fā)酵溫度不低于30℃，優(yōu)選不低于32℃。發(fā)酵時間不少于6天，優(yōu)選為6天。

其中，種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中，所含碳源獨立地選取淀粉、葡萄糖、蔗糖、糖蜜中的任意數(shù)量種，所含氮源獨立地選取黃豆餅粉、玉米漿干粉、花生粉、酵母粉、棉籽粉、低溫豆粕中的任意數(shù)量種。優(yōu)選的，種子培養(yǎng)基采用如下配比：蔗糖40-60、黃豆粉8-12、NH4NO₃ 1.0-1.5、MgSO₄·7H2O1.0-1.5、KH₂PO₄ 1.0-1.5’，單位為g/L；發(fā)酵培養(yǎng)基采用如下配比：淀粉80-120，黃豆餅粉10-15、玉米漿干粉20-30、K₂SO₄ 1.2-2.0、MgSO₄·7H₂O 1.0-1.5、ZnSO₄·7H₂O 4-5×10^-3，單位為g/L。