[發明專利]ZNF781基因在制備宮頸癌診斷試劑中的應用

有效

• 申請號: 202210957527.8
• 申請日: 2022-08-10
• 公開（公告）號: CN115725734B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發明（設計）人: 王煜;傳軍;朱碧銀;陳可欣;顓孫丹丹;卜中鑫;趙展平
• 申請（專利權）人: 人和未來生物科技（長沙）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 羅新

本發明公開了ZNF781基因在制備宮頸癌診斷試劑中的應用。本發明方案將ZNF781基因用于制備宮頸癌診斷試劑，擴增得到的目標序列短，擴增效率高，可用于準確檢測宮頸癌，操作簡單、快捷、低成本，適用于臨床檢測。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及ZNF781基因在制備宮頸癌診斷試劑中的應用。

背景技術

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，排在乳腺癌之后，其發病進程由正常宮頸細胞且發病率呈現年輕化趨勢。99％的宮頸癌患者的宮頸脫落細胞中檢測到人類乳頭狀瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)，因此宮頸高級病變和宮頸癌作為病因明確的疾病，可做到早預防、早干預；在HPV感染中，91％的HPV病毒為一過性感染可被自身免疫系統清除，正常的宮頸細胞經過癌前病變發展到浸潤癌有5-10年的潛伏期，因此早發現、早診斷、早治療是預防宮頸癌的重要手段。

宮頸癌篩查以早期發現高級別癌前病變并進行阻斷性治療為目標，盡早篩查、及時發現和適當治療是防治宮頸癌的重要手段。宮頸癌的篩查技術經歷了幾十年的發展，目前用于宮頸癌篩查的主要分為三種，一種是目測法，直接用肉眼觀察經化學處理后細胞的變化，一種是采集宮頸脫落細胞，觀察細胞形態學的變化，還有一種檢測高危型HPV病毒。

目前臨床上應用的宮頸癌篩查手段為女性健康做出了巨大貢獻，同時也存在其不可避免的缺陷：首先，傳統的細胞學篩查手段，包括巴士涂片及液基細胞學(TCT)，因為其整個過程包括取樣、抹片制備、觀察、結果判讀等多個環節受人為因素影響較大，造成漏檢幾率較高。其次，近年興起的病原學篩查HPV-DNA檢測技術，因其檢測的僅是HPV病原存在與否，而HPV病毒的存在大部分是一過性的，也意味著這些被自身免疫清除掉的HPV感染者也會被判定為陽性，從而導致過度醫療。發明人期望挖掘出能與癌前病變緊密相關的分子指標，以彌補目前我國臨床上應用的宮頸癌篩查手段中的不足。DNA的異常甲基化是腫瘤發生過程中的早期事件，尋找和研究疾病特異性的新甲基化標志物，可以為宮頸癌篩查、診斷和治療提供新的思路。

發明內容

本發明旨在至少解決上述現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明提出ZNF781基因在制備宮頸癌診斷試劑中的應用。

本發明還提出一種ZNF781基因甲基化的檢測試劑。

本發明還提出一種含有上述ZNF781基因甲基化檢測試劑的試劑盒。

本發明還提出一種上述ZNF781基因甲基化檢測試劑或試劑盒的應用。

在本發明的一個方面，提出了ZNF781基因在制備宮頸癌診斷試劑中的應用。

在本發明的一些實施方式中，所述ZNF781基因為經甲基化的ZNF781基因。

在本發明的第二方面，提出了一種ZNF781基因甲基化的檢測試劑，所述ZNF781基因甲基化檢測試劑包括：序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物、序列如SEQ ID NO：4所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：5所示的反向引物，和/或序列如SEQ ID NO：7所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：8所示的反向引物。

在本發明的一些實施方式中，所述ZNF781基因甲基化檢測試劑還包括核苷酸序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6和/或SEQ ID NO：9所示的熒光探針序列。所述SEQ ID NO：3所示的熒光探針序列為與如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物相匹配的熒光序列；所述SEQ ID NO：6所示的熒光探針序列為與如SEQ ID NO：4所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：5所示的反向引物相匹配的熒光序列；所述SEQ ID NO：9所示的熒光探針序列為與如SEQ ID NO：7所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：8所示的反向引物相匹配的熒光序列