[發(fā)明專利]抗CD70內(nèi)化的抗體、抗體偶聯(lián)物及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210942655.5
• 申請日: 2021-06-17
• 公開（公告）號: CN116120451A
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張軍鋒;郭志剛
• 申請（專利權(quán)）人: 南京藍盾生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;G01N33/68;A61K39/395;A61K47/68;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王宇婷

本發(fā)明公開了一種抗CD70內(nèi)化的抗體、抗體偶聯(lián)物及其應(yīng)用。本申請以人源CD70為靶點，成功開發(fā)得到可結(jié)合人源CD70分子的抗體，該抗體特異性好，親合力較高，結(jié)合細胞表面表達的人源CD70，并可被細胞高效轉(zhuǎn)運至胞內(nèi)；由于該抗體具有內(nèi)化功能，進而可以攜帶毒素分子進入細胞殺死該細胞，起到治療癌癥的作用。因此，該抗體具有新穎的特性及藥物開發(fā)方向，是腫瘤免疫治療的潛在藥物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種抗CD70內(nèi)化的抗體、抗體偶聯(lián)物及其應(yīng)用。本發(fā)明是申請?zhí)?02110675328.3，名稱為抗CD70內(nèi)化的抗體、抗體偶聯(lián)物及其應(yīng)用的分案申請。

背景技術(shù)

CD70分子，即腫瘤壞死因子受體超家族7因子(TNFSF7)，多肽鏈長193個a.a.，分子量21.1KD，是一種Ⅱ型跨膜糖蛋白(尚未見可溶形式)，C端155個氨基酸位于膜外；胞外的第一、三及第二、四個半胱氨酸之間形成二硫鍵，維持胞外部分的空間結(jié)構(gòu)；通常其以同源三聚體形式存在于膜上。在正常組織中，CD70的細胞表達譜較窄，主要表達于生發(fā)中心的B細胞(誘導分泌抗體)和局部淋巴組織的T細胞，在胸腺髓質(zhì)上皮細胞中低水平表達。但其表達可被抗原誘導大量增加并隨著免疫應(yīng)答的減弱而減少，比如抗原誘導活化的T、B細胞中高表達CD70。同時其表達受到細胞因子的調(diào)控，如IL1a、IL12、TNFa、GM-CSF可上調(diào)CD70表達，IL4、IL10下調(diào)CD70表達。另外在成熟的DCs中，在TLR信號通路的介導下CD70表達。這些現(xiàn)象正好表明CD70為初始T細胞完全活化所需的一種協(xié)同刺激分子，在調(diào)控免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。其與配體CD27相互作用，不僅起著T細胞活化第二信號的作用，而且二者之間的互作還可以調(diào)節(jié)B、NK等免疫細胞的增殖和分化。

短暫表達于活化的T和B淋巴細胞及成熟DC細胞中的CD70，在病理狀態(tài)下卻高表達于多種腫瘤組織中。大量研究表明，CD70在淋巴瘤、腎癌、膠質(zhì)細胞瘤、乳腺癌、血源性惡性腫瘤(如霍奇金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、白血病等)等多種腫瘤組織中高水平表達。同時觀察到CD27在這些組織中的表達與CD70同步上升或下降。可能二者作為配體/受體對，形成了反饋環(huán)，促進淋巴細胞的增殖與分化，反而起到介導疾病發(fā)生的作用。CD70與CD27互作后，CD27活化，TRAF2/5結(jié)合到其胞內(nèi)段，進一步激活NF-KB和c-Jun激酶信號通路，引起細胞增殖、生存和分化等。另外，亦有人認為CD70與CD27結(jié)合后也可能使CD27胞內(nèi)段結(jié)合Siva從而引起Caspase介導的細胞凋亡。

鑒于以上現(xiàn)象，以CD70為靶點制備特異性抗體，開展腫瘤免疫治療引起人們濃厚興趣。目前針對CD70靶點，CART治療、抗體藥和抗體偶聯(lián)藥物三種應(yīng)用方式均在開發(fā)中，進展最快的為強生與arGEN-X合作開發(fā)的庫薩圖珠單抗(Cusatuzumab，研發(fā)代號ARGX-110)，目前已完成I期臨床，結(jié)果顯示庫薩圖珠單抗聯(lián)合維達扎可顯著降低AML患者骨髓中的白血病干細胞，證實該靶點的可靠性。

鑒于CD70/CD27分子對重要免疫調(diào)節(jié)功能，對CD70進行調(diào)控必然會引起一系列的T細胞、甚至B細胞及NK細胞等淋巴細胞的信號傳遞及生理反應(yīng)，是一個很理想的免疫治療靶點，合理應(yīng)用有可能調(diào)動多種細胞免疫。目前靶向CD70的療法有CART及裸抗，臨床效果有限，特別是對實體瘤來說，這兩種方法幾乎無效。研發(fā)人員普遍認為，抗體藥物偶聯(lián)物ADC將是未來治療癌癥的希望之一。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本申請?zhí)峁┝艘环N抗CD70內(nèi)化的抗體、抗體偶聯(lián)物及其應(yīng)用。

技術(shù)方案：本申請所述的一組抗CD70內(nèi)化的抗體，其重鏈可變區(qū)CDR1的氨基酸序列選自SEQ?ID?NO：1-16，CDR2的氨基酸序列選自SEQ?ID?NO：17-32，CDR3的氨基酸序列選自SEQ?ID?NO：33-48。

進一步優(yōu)選的，本申請所述抗CD70內(nèi)化的抗體，包括以下任一所示重鏈可變區(qū)：