[發明專利]一種茄科雷爾氏菌噬菌體及其組合物、試劑盒和應用

在審

• 申請號: 202210940732.3
• 申請日: 2022-08-06
• 公開（公告）號: CN115725512A
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發明（設計）人: 徐天舜;許文建;華雨田;叢郁;徐旭凌;喬歡;何四龍;肖逍;丁良
• 申請（專利權）人: 菲吉樂科（南京）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A01N63/40;A01N59/20;A01P1/00;C12R1/92
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 智業

本發明公開了一種茄科雷爾氏菌噬菌體及其組合物、試劑盒和應用，茄科雷爾氏菌噬菌體為茄科雷爾氏菌噬菌體RS?P48（Ralstonia solanacearum phage RS?P48），保藏編號為CCTCC NO:M 2020748；本發明的茄科雷爾氏菌噬菌體RS?P48是從自然界中分離的烈性噬菌體，對pH具有較高的耐受性，適用在不同的防治環境中，能夠對桉樹青枯病起到較好的生物防治效果。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種新的茄科雷爾氏菌噬菌體、其組合物以及它們的制備方法和應用。

背景技術

細菌性青枯病是由茄科雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一種世界范圍的細菌性土傳病害，廣泛分布于熱帶、亞熱帶及某些溫帶地區。茄科雷爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)具有廣泛的寄主，可侵染50多個科的200多種植物，其中馬鈴薯、番茄、煙草等茄科作物受害最為嚴重。由于“溫室效應”所引起的全球氣候變暖，該菌表現出向高緯度冷涼地區蔓延的趨勢，給作物生產帶來極大威脅。

茄科雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)不僅侵染茄科作物，還會侵染非茄科經濟作物，可導致如：桉樹青枯病、芝麻青枯病；南瓜青枯病；草莓青枯病；菊花青枯病；空心菜青枯病等病害。以桉樹青枯病為例，茄科雷爾氏菌侵染桉樹后可導致桉樹幼苗整株枯死或幼苗基部葉片變紅變紫現象。目前，對作物青枯病的防治方法主要包括農業防治、物理防治、藥劑防治等，上述方法雖然對青枯病起到了一定的控制作用，但依然無法全面有效地控制該病發生。

因此，有必要開發一種新型噬菌體對非茄科經濟作物青枯病害的防治方法。

發明內容

針對以上技術現狀，本發明提供了1株茄科雷爾氏菌的噬菌體及其組合物，本發明噬菌體具有較強的裂解不同作物來源的茄科雷爾氏菌的能力。

本發明提供的一種茄科雷爾氏菌噬菌體及其組合物、試劑盒和應用，采用如下的技術方案：

第一方面，本發明提供一種茄科雷爾氏菌噬菌體，采用如下的技術方案：

一種茄科雷爾氏菌噬菌體，所述茄科雷爾氏菌噬菌體為茄科雷爾氏菌噬菌體RS-P48 (Ralstonia solanacearum phage RS-P48)，保藏編號為CCTCC NO:M 2020748，保藏單位為中國典型培養物保藏中心，保藏日期為2020年11月16日。

通過采用上述技術方案，本申請提供一種茄科雷爾氏菌噬菌體RS-P48，該噬菌體具有優良的耐pH性能，現已存放在中國典型培養物保藏中心進行保藏，保藏編號為CCTCCNO:M 2020748。

優選的，所述茄科雷爾氏菌噬菌體RS-P48(Ralstonia solanacearum phage RS-P48)為烈性噬菌體，有一呈多面體立體對稱的頭部和較短的尾部，頭部直徑為70～80nm，尾部的長度為35～40nm，尾部直徑為10～16nm，屬于Autographiviridae科噬菌體。

通過采用上述技術方案，從電鏡中觀察噬菌體的形貌，可知該噬菌體具有多面體立體對稱的頭部和可伸縮的尾部，有助于頭部的核酸注入宿主菌中，還可有效識別宿主菌表面的特殊受體。

優選的，所述茄科雷爾氏菌噬菌體RS-P48(Ralstonia solanacearum phage RS-P48)具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

優選的，所述茄科雷爾氏菌噬菌體RS-P48(Ralstonia solanacearum phage RS-P48)在感染復數MOI＝0.00000001條件下培養24h，其效價為9.6×10¹⁰PFU/mL。