[發(fā)明專利]一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210936740.0
• 申請日: 2022-08-05
• 公開（公告）號: CN115960914A
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林新春;卓娟;侯丹;裴佳龍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/02;A01H6/20
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 沈淵琪

一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1及其應(yīng)用，屬于分子生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明一方面提供了毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1基因序列，另一方面提供了毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1的用途。本發(fā)明提供了一種重要的并且可能具有普適性的調(diào)控植物開花的基因資源，為縮短植物開花周期提供了優(yōu)秀的候選基因。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

毛竹(Phyllostachys?edulis)屬于禾本科(Poaceae)竹亞科(Bambusoideae)剛竹屬(Phyllostachys)，在我國分布范圍廣，被廣泛應(yīng)用于觀賞、木材加工、食用等方面，具有很高的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值。毛竹具有獨(dú)特的開花特性，開花周期據(jù)統(tǒng)計(jì)長達(dá)67年，其開花前沒有明顯征兆，開花后成片死亡，將造成重大的經(jīng)濟(jì)損失，因此，研究竹子開花分子機(jī)制具有重要意義。近年來已經(jīng)在毛竹中鑒定出一系列開花相關(guān)的基因，除此之外，毛竹基因組測序工作的完成和高通量測序的普及化也為毛竹開花機(jī)理研究打下了良好的基礎(chǔ)。雖然前期開展了很多關(guān)于開花基因功能的研究，但竹子成花原因及其調(diào)控機(jī)制仍不清楚，需進(jìn)行更深入的探索。

F-box基因家族是植物中最大的基因家族之一，該家族基因廣泛參與到植物的生長發(fā)育、植物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及生物和非生物脅迫中。其中FKF1屬于ZTL/FKF1/LKP2亞家族，該基因在水稻、擬南芥等模式物種中已經(jīng)得到深入研究，研究結(jié)果表明其在多條開花調(diào)控途徑中發(fā)揮重要作用，其中光周期調(diào)控通路中，F(xiàn)KF1基因通過促進(jìn)成花素等基因的表達(dá)最終促進(jìn)植物開花。

綜上所述，對參與毛竹開花通路相關(guān)基因FKF1的研究可以為竹子開花機(jī)理研究提供一定科學(xué)基礎(chǔ)，為解開毛竹開花之謎、竹子遺傳改良等提供了一定保障。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1及其應(yīng)用的技術(shù)方案。

本發(fā)明具體通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明第一方面提供了一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1，該基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

本發(fā)明第二方面提供了一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1在調(diào)控植物開花時(shí)間中的應(yīng)用。

本發(fā)明第三方面提供了一種毛竹開花相關(guān)基因PheFKF1在調(diào)控植物提前抽薹中的應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述的應(yīng)用，其具體使植物包含基因PheFKF1或使植物過表達(dá)基因PheFKF1。

進(jìn)一步，所述的應(yīng)用，其方法為：構(gòu)建含有基因PheFKF1的植物過表達(dá)載體，將其異源轉(zhuǎn)化到擬南芥中，篩選獲得T3代陽性植株，通過轉(zhuǎn)基因植株和野生型植株表型分析，獲得抽薹時(shí)間提前的植株。

進(jìn)一步，所述的應(yīng)用，其方法為：具體包括以下步驟：

1)材料準(zhǔn)備：毛竹種子采集自廣西桂林，于溫度：26℃；濕度：80％的玻璃溫室培養(yǎng)1個(gè)月，采集幼嫩葉片置于-80℃保存，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用；

2)對采集的幼嫩葉片進(jìn)行RNA提取，反轉(zhuǎn)錄成cDNA，克隆出PheFKF1的CDS序列，再將其連接pMD18-T載體進(jìn)行測序，鑒定正確后構(gòu)建過表達(dá)載體，異源轉(zhuǎn)化到擬南芥中；

3)利用潮霉素抗性和PCR技術(shù)對PheFKF1基因異源轉(zhuǎn)化擬南芥進(jìn)行了陽性植株篩選，得到T3代陽性植株，并對其進(jìn)行了RNA提取和表型統(tǒng)計(jì)，驗(yàn)證其獲得了抽薹時(shí)間提前的植株。

本發(fā)明具有以下有益效果：

1、本發(fā)明首次從毛竹中獲得PheFKF1基因，并驗(yàn)證了其調(diào)控開花的生物學(xué)功能。

2、本發(fā)明首次將毛竹PheFKF1基因在擬南芥中過量表達(dá)，運(yùn)用PCR方法證明該基因已成功整合到擬南芥基因組中，即陽性植株。