[發明專利]一株貝萊斯芽孢桿菌GSSN及其在防治松材線蟲中的應用

在審

• 申請號: 202210930800.8
• 申請日: 2022-08-04
• 公開（公告）號: CN115960747A
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 呂全;鄭桂恒;王慧敏
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院森林生態環境與自然保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P5/00;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理有限公司 11562
• 代理人: 李哲

本發明公開了一株貝萊斯芽孢桿菌GSSN及其在防治松材線蟲中的應用，屬于生物技術領域。本發明公開了一種貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus?velezensis)GSSN，其于2022年5月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.24849。還公開貝萊斯芽孢桿菌GSSN無菌發酵液以及包含貝萊斯芽孢桿菌GSSN和/或其代謝產物的微生物菌劑在抑殺松材線蟲、拮抗松材線蟲伴生真菌方面來防治松材線蟲病中的應用。本發明公開的貝萊斯芽孢桿菌GSSN及其代謝產物對松材線蟲及其伴生真菌拮抗作用明顯，為松材線蟲病的防治提供新的生防菌類型，對植物線蟲的防治具有重要的意義。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別是涉及一株貝萊斯芽孢桿菌GSSN及其在防治松材線蟲中的應用。

背景技術

松材線蟲病(pine?wilt?disease)，是由松材線蟲(Bursaphelenchus?xylophilus(SteinerBubrer)Nickle)引起的一種松樹毀滅性病害。松材線蟲病是一個復雜的病害系統，發病因素復雜，包括松材線蟲、寄主松樹、媒介昆蟲、真菌、細菌、人為活動和環境等。松材線蟲病傳播迅速，初期發病部位隱蔽，存在潛伏侵染的現象，導致該病治理難度大，至今未能得到完全控制和根除。自1982年中國南京發現以來，松材線蟲病已遍及19個省的731個縣，共造成10億多棵松樹死亡，直接和間接的經濟、生態損失已達數千億元(國家林業和草原局2022年第6號公告)。

松材線蟲的生活史中，有一個重要的食菌階段。在這個階段，松材線蟲可以通過取食多種真菌來維持自身的生長和種群的繁殖。目前已知可促進松材線蟲生長和繁殖的真菌有很多種，同時也有少量對松材線蟲不利的真菌。有研究表明，伴生真菌Sporothrix?sp.1與從木質部提取的DAA聯合接種至有松材線蟲的木段中，可使松材線蟲產生大量的后代，且雌雄比差異較大，發育速度較快。除此之外，松材線蟲也可以產生線蟲蛔甙(Ascarosides)物質促進真菌的生長和產孢，從而增加線蟲的種群數量，提高媒介昆蟲攜帶數量，加重病害的發生。

目前，針對松材線蟲病，中國主要從病原和傳播媒介兩個方面，以預防為主，結合物理、化學和生物防治進行綜合治理，但都沒能完全控制和消除疫區。近年來，隨著人們的環保意識逐步提高，生物防治越來越受到重視。目前，針對松材線蟲病的生物防治可大致分為以下幾方面：

(1)針對媒介昆蟲：松墨天牛是松材線蟲的主要傳播媒介，松墨天牛的防治一方面通過釋放生物信息素對其進行誘殺，另一方面通過釋放松墨天牛天敵進行捕殺。但目前存在的問題是，釋放生物信息素無法回答防治后林間剩余天牛數量，目前，利用病原真菌和昆蟲天敵防治松材線蟲應用較多。病原真菌包括綠僵菌(Metarhizium?anisopliae)、白僵菌(Beauveria?bassiana)等。寄生天敵主要有花絨寄甲(Dastarcus?helophoroides)、管氏腫腿蜂(Scleroderma?guani)、川硬皮腫腿峰(Scleroderma?sichuanensis)等。但這些方法受林間的生物和非生物因素影響較大，防治效果不具穩定性和確定性。

(2)針對病原線蟲：目前在防治松材線蟲應用最多的是生物殺菌劑阿維菌素、甲維鹽等注干藥劑，注藥一次能防2-3年。但是這種樹干注射劑價格高，注射全程由人工完成，因此仍然成本較高，通常只能應用在重要區域或古樹名木上。目前，中國也開始做松樹抗松材線蟲病的抗性育種，但這是一條長期的道路，無法在短期內實現。

因此，許多國家的研究者們也都在努力尋找防治植物線蟲的新途徑。開發具有高效、低毒的生物防治劑已經迫在眉睫，利用有益微生物防治線蟲成為了發展生物防治劑的重要途徑。