[發(fā)明專利]GrB在預(yù)測胃癌預(yù)后或免疫特征的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210928506.3
• 申請(qǐng)日: 2022-08-03
• 公開（公告）號(hào): CN114994336B
• 公開（公告）日: 2023-01-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程向東;袁莉;徐志遠(yuǎn);于鵬程;王燦銘;鄭源思
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江省腫瘤醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/574;G01N33/53;C12Q1/6886;C12Q1/6869;G16H50/30
• 代理公司: 北京國翰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11696
• 代理人: 張?zhí)斐?/td>

本發(fā)明公開了GrB在預(yù)測胃癌預(yù)后或免疫特征的應(yīng)用，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過mRNA測序證實(shí)患者的腫瘤組織和癌旁組織之間GrB表達(dá)存在顯著差異后，使用免疫組織化學(xué)染色對(duì)腫瘤組織和癌旁組織的GrB表達(dá)水平進(jìn)行檢測分析，并結(jié)合后期對(duì)患者隨訪獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，證明GrB在胃癌的免疫細(xì)胞浸潤中發(fā)揮重要作用，并在胃癌的發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，可以作為胃癌預(yù)后以及預(yù)測患者是否出現(xiàn)免疫細(xì)胞浸潤的標(biāo)志物，從而對(duì)患者的個(gè)性化診療做出指導(dǎo)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及GrB在預(yù)測胃癌預(yù)后或免疫特征的應(yīng)用。

背景技術(shù)

胃癌（Gastric cancer，GC）是世界上最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率和死亡率都很高。超過70%的新患者是在發(fā)展中國家確診的。盡管近年來胃癌的診斷和治療取得了進(jìn)展，但其5年總生存率仍不令人滿意。因此，發(fā)現(xiàn)胃癌發(fā)生的分子機(jī)制，識(shí)別有效的分子生物標(biāo)志物對(duì)胃癌患者至關(guān)重要。

顆粒酶（GZMs）是絲氨酸蛋白酶家族的成員，其特征是組氨酸-天冬氨酸-絲氨酸催化三聯(lián)體，它能破壞大蛋白質(zhì)的肽鍵以合成小蛋白質(zhì)。到目前為止，已經(jīng)鑒定出5種人類顆粒酶（A，B，H，K和M）和11種小鼠顆粒酶。這些顆粒酶不僅能在細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTLs）和自然殺傷細(xì)胞（NKs）中表達(dá)，還能在肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞中表達(dá)。Grs最初被認(rèn)為僅限于淋巴細(xì)胞，如今被認(rèn)為表達(dá)更廣泛。Granase A可以在非淋巴細(xì)胞細(xì)胞中表達(dá)，如卵巢顆粒細(xì)胞，還有其他不同于細(xì)胞毒性的功能。Granase M在白血病細(xì)胞和實(shí)體腫瘤細(xì)胞系（HeLa）中表達(dá)，促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)癌細(xì)胞向上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。Granase B（GrB）不僅在一定數(shù)量的其他造血細(xì)胞中表達(dá)，包括白血病細(xì)胞，也在正常的非造血細(xì)胞中表達(dá)，如角化細(xì)胞、卵巢顆粒細(xì)胞、精母細(xì)胞、關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞。此外，在人類原發(fā)性乳腺癌的一個(gè)亞群中檢測到GrB，提示實(shí)體瘤可能產(chǎn)生GrB。GrB也在膀胱癌中表達(dá)，并影響上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和侵襲能力。GrB可能在非造血腫瘤細(xì)胞中直接表達(dá)，但GrB在胃癌中的作用尚未明確。

目前，胃癌標(biāo)志物屬于研究的熱門領(lǐng)域，先后有不少標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)，例如中國專利CN108034722A公開了一種lncRNA SGOL1-AS1在作為胃癌診斷標(biāo)志物的應(yīng)用；中國專利CN106319038A公開了用于胃癌早期篩查的基因標(biāo)志物及其應(yīng)用，該專利為基因標(biāo)志物。可見，目前對(duì)于基因或RNA標(biāo)志物的研究較多，但基因或RNA標(biāo)志物在臨床檢測中需要較為繁瑣的步驟，因此有關(guān)蛋白或酶類的標(biāo)志物以及相關(guān)的檢測方法還需進(jìn)一步研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種胃癌標(biāo)志物，用于胃癌預(yù)后以及預(yù)測胃癌患者是否出現(xiàn)免疫細(xì)胞浸潤。

為達(dá)到上述發(fā)明目的，采用如下技術(shù)方案。

一種GrB的用途，其特征在于，包括以下至少一種：

作為胃癌的預(yù)后標(biāo)志物；和/或

作為免疫細(xì)胞浸潤的標(biāo)志物。

本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)GrB在胃癌的免疫細(xì)胞浸潤中發(fā)揮重要作用，并在胃癌的發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，因此GrB能夠用于胃癌預(yù)后以及預(yù)測胃癌患者免疫細(xì)胞浸潤情況。

優(yōu)選地，一種GrB的用途，包括以下至少一種：

作為胃癌的預(yù)后標(biāo)志物，其中，進(jìn)行預(yù)后判斷時(shí)，使用患者腫瘤組織及癌旁組織切片陽性細(xì)胞數(shù)的中位數(shù)作為截?cái)嘀祵?duì)GrB的表達(dá)量進(jìn)行判斷，陽性細(xì)胞數(shù)≥截?cái)嘀禐镚rB高表達(dá)；否則認(rèn)為是GrB低表達(dá)；和/或

作為免疫細(xì)胞浸潤的標(biāo)志物；其中，免疫細(xì)胞浸潤包括CD3+T細(xì)胞浸潤和CD8+T細(xì)胞浸潤。

優(yōu)選地，GrB作為胃癌的預(yù)后標(biāo)志物時(shí)，預(yù)后的判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：

腫瘤組織中GrB高表達(dá)的胃癌患者總生存期延長，癌旁組織中GrB低表達(dá)的胃癌患者總生存期延長。