[發明專利]一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210898333.5
• 申請日: 2022-07-28
• 公開（公告）號: CN115960068A
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 徐靜;鄧小林;馮婷;韋成文
• 申請（專利權）人: 海南大學
• 主分類號: C07D311/86
• 分類號: C07D311/86;A61K31/352;A61P37/06
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 文小花

本發明提供一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物及其制備方法和應用，由天門冬擬莖點霉Phomopsis?asparagi?DHS?48分離得到新的色酮類化合物，命名為：Phomopsinol?A，本發明確定了Phomopsinol?A化合物的平面結構和立體結構，并經過細胞免疫抑制活性實驗研究表明，Phomopsinol?A化合物具有較好的免疫抑制活性且細胞毒性低，可通過直接降低鈣調磷酸酶活性發揮免疫抑制作用，可作為抑制細胞內NFAT蛋白表達，抑制CN/NFAT信號通路的免疫抑制劑，用于制備免疫性疾病的免疫抑制藥物。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，特別涉及一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物及其制備方法和應用。

背景技術

色酮學名苯并-γ-吡喃酮，具有其母核結構的衍生物統稱為色酮類化合物，是一類廣泛存在于自然界中的生物活性物質，如具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗癌等多種生物活性，其生物活性與其取代情況有著密切的關系，不同的色酮結構表現不同的生物活性。隨著越來越多的色酮類化合物被分離鑒定后，其生物活性研究受到國內外學者的重視，成為藥物研發的熱點之一，因此，色酮新結構的不斷發現，有利于促進色酮類化合物在藥物研發領域中廣泛利用。

在自然微生物菌中，其能夠產生萘酚類、黃酮類、生物堿、甾體和萜類等多種次生代謝產物。天門冬擬莖點霉為Phomopsis屬微生物真菌，分生孢子器球形、凸鏡形、半球形或立錐形，常在不明顯的斑點中形成，器壁厚而堅硬，多數革質或炭質。目前尚未有從天門冬擬莖點霉中分離出色酮類化合物的相關報道。

發明內容

鑒于此，本發明提出一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物及其制備方法和應用

本發明的技術方案是這樣實現的：

本發明提供一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物，所述色酮類化合物命名為：Phomopsinol?A，其化學結構式如下所示：

進一步說明，所述Phomopsinol?A是通過加入表觀遺傳修飾劑丁酸鈉對天門冬擬莖點霉Phomopsis?asparagi?DHS-48進行表觀遺傳調控，分離得到；丁酸鈉的濃度為50μM。

一種具有免疫抑制活性的色酮類化合物的制備方法，包括如下步驟：

(1)將天門冬擬莖點霉菌Phomopsis?asparagi發酵獲得的菌絲體采用乙酸乙酯浸提，重復3次，每次72h，濃縮并合并提取物，得到粗提物；

(2)將粗提物在硅膠柱色譜上進行色譜分離，使用CH₂Cl₂-甲醇二元系統進行梯度洗脫，CH₂Cl₂與甲醇的體積比為：100:0-0:100，極性依次遞增，得到Fr.1-Fr.9組分；

(3)將組分Fr.6置于硅膠CC采用體積比為2:1的CH₂Cl₂-乙酸乙酯洗脫液等度洗脫，得到Fr.6.1-Fr.6.6組分；

(4)將組分Fr.6.3置于葡聚糖凝膠Sephadex?LH-20CC采用體積比為1:1的甲醇-CH₂Cl₂純化得到Phomopsinol?A。

進一步說明，Phomopsinol?A在制備免疫抑制劑中的應用。

Phomopsinol在制備以鈣調磷酸酶為靶點，抑制鈣調磷酸酶活力的免疫抑制劑中的應用。

Phomopsinol?A在制備抑制細胞內NFAT蛋白表達的免疫抑制劑中的應用。

Phomopsinol?A在制備抑制CN/NFAT信號通路的免疫抑制劑中的應用。