[發明專利]一種用于殺滅血吸蟲的雙鏈RNA及其應用

在審

• 申請號: 202210896393.3
• 申請日: 2022-07-28
• 公開（公告）號: CN115927312A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 胡薇;楊文彬;李健;徐斌;孫成松;羅芳;張瑞祥
• 申請（專利權）人: 復旦大學;中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所（國家熱帶病研究中心）
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61P33/12
• 代理公司: 上海浦一知識產權代理有限公司 31211
• 代理人: 陳鈞

本發明公開了一種用于殺滅血吸蟲的雙鏈RNA及其應用，所述雙鏈RNA的正義鏈的核苷酸序列如SEQ?ID?N0:1所示。通過動物實驗，該雙鏈RNA對血吸蟲的蟲體早期感染建立階段(1?30dpi)、感染建立后的蟲體發育階段(18?30dpi)、建立感染后的成熟蟲體階段(26?42dpi)均具有較好的殺滅效果，不僅能夠阻止血吸蟲在宿主體內建立感染和有效抑制蟲體的生長發育，還能夠減少雌蟲的產卵甚至殺滅已建立感染的蟲體，以及減輕對宿主的病理損傷，具有巨大的治療方面的潛力，可用于治療不同發育階段血吸蟲的感染。

技術領域

本發明涉及分子生物學及生物醫藥技術領域，特別涉及一種用于殺滅血吸蟲的雙鏈RNA?及其應用。

背景技術

血吸蟲病是一種重要的人畜共患性寄生蟲病，大量蟲卵的沉積是血吸蟲病的主要發病機制，當蟲卵沉積在周圍的組織和器官中，如在肝臟或膀胱，會引起炎癥性免疫反應(如肉芽腫)，導致腸道、肝臟、脾臟和泌尿生殖系統性疾病。

目前血吸蟲病的治療方式依賴于單一藥物吡喹酮，吡喹酮具有療效高、副作用小、口服方便和成本低等特點，即使依靠這種單一用藥也已經治療了大約2.5億人，且已有研究報道在部分地區血吸蟲出現了抗藥性，此外，吡喹酮不能有效作用于童蟲，這使得吡喹酮不能有效防止幼蟲的成熟以及急性的再次感染，所以確定新的藥物靶標仍然是血吸蟲病領域的研究人員關注的一個熱點。缺乏有效疫苗，且治療藥物單一及蟲體耐藥性的出現均導致新治療手段的研發迫在眉睫。

由于生命周期復雜、缺乏永生化細胞系、蟲體基因組大且對基因操作有很強的“頑固性”等因素導致血吸蟲的基因編輯發展十分緩慢。基因操縱手段的缺乏極大限制了血吸蟲基因功能研究，從而阻礙了抗血吸蟲藥物或疫苗的研發。目前在血吸蟲中普遍應用的僅有RNA干擾技術，其原理是通過一種外源的基因特異性雙鏈RNA觸發同源mRNA轉錄物降解，從而導致靶標基因的轉錄后沉默。2018年，Li等首次采用尾靜脈注射的方法將dsRNA注入感染血吸蟲的小鼠體內，證實該方法可以有效抑制SjCB1的表達并可阻滯蟲體的生殖發育，從而進一步將該方法擴展應用到了宿主體內蟲體寄生和生殖發育相關基因的功能研究，也為抗血吸蟲提供了新的治療手段。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明旨在提供一種用于殺滅血吸蟲感染的雙鏈RNA及其應用，該雙鏈RNA能夠針對不同發育時間點感染的血吸蟲，可用于針對血吸蟲的蟲體早期感染建立階段(1-30dpi)、感染建立后的蟲體發育階段(18-30dpi)、建立感染后的成熟蟲體階段?(26-42dpi)的治療，能夠有效治療血吸蟲病。

為解決上述技術問題，本發明一種用于殺滅血吸蟲的雙鏈RNA及其應用，其特征在于，所述雙鏈RNA的正義鏈的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

本發明還提供所述的雙鏈RNA在制備抗血吸蟲藥物中的應用。

具體的，所述血吸蟲為日本血吸蟲。

具體的，所述雙鏈RNA在體內抑制早期日本血吸蟲感染建立階段(1-30dpi)方面的應用。

具體的，所述雙鏈RNA在體內抑制感染建立后的日本血吸蟲蟲體發育階段(18-30dpi)?方面的應用。

具體的，所述雙鏈RNA在體內抑制感染建立后的日本血吸蟲成熟蟲體階段(26-42dpi)?方面的應用。

具體的，所述雙鏈RNA在體內抑制日本血吸蟲蟲體產卵和蟲卵活力方面的應用。

具體的，所述雙鏈RNA在體內減輕日本血吸蟲對宿主肝臟病理損傷方面的應用。

具體的，所述藥物的劑型為注射劑、口服劑、口含片、噴霧劑、混懸劑、膠囊劑、片劑、丸劑或顆粒劑。

具體的，所述藥物還包括藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑中的一種或幾種，也包括以生理鹽水作為溶劑制成的血吸蟲dsRNA?SRP54溶液。