[發(fā)明專利]甘油脫氫酶突變體、產(chǎn)二羥基丙酮的工程菌及其用途在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210892893.X | 申請日： | 2022-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN115717132A | 公開（公告）日： | 2023-02-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張保國;曾俊華;袁辰陽;張靜嫻 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學院上海高等研究院 |
| 主分類號： | C12N9/04 | 分類號： | C12N9/04;C12N15/53;C12N1/21;C12N15/74;C12P7/26;C12R1/01;C12R1/02 |
| 代理公司： | 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 聶月美;許亦琳 |
| 地址： | 201210 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 甘油 脫氫酶 突變體 羥基 丙酮 工程 及其 用途 | ||
1.甘油脫氫酶突變體，其特征在于，所述的突變體是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的甘油脫氫酶為親本，將親本第527位突變和/或649位突變。
2.如權(quán)利要求1所述的突變體，其特征在于，將親本第527位的色氨酸突變?yōu)楸彼?；?或，將親本第649位的酪氨酸突變?yōu)楸彼帷?/p>
3.與權(quán)利要求1或2所述的突變體相關的生物材料，其特征在于，包括如下技術特征中的至少一項：
a)編碼如權(quán)利要求1或2所述的突變體的核苷酸；
b)含有a)所述的核苷酸的重組表達載體；
c)含有a)所述的核苷酸的工程菌，或含有b)所述的重組表達載體的工程菌。
4.產(chǎn)二羥基丙酮的工程菌，其特征在于，所述的工程菌過表達如權(quán)利要求1或2所述的突變體。
5.如權(quán)利要求4所述的工程菌，其特征在于，所述的工程菌的出發(fā)菌株為能將甘油轉(zhuǎn)化為二羥基丙酮的菌株，優(yōu)選選自醋酸桿菌屬和葡萄糖酸桿菌屬菌株；
和/或，所述的工程菌為氧化葡萄糖酸桿菌BD7(Gluconobacter oxydans JBD7)，其保藏編號為CCTCC NO:M 2022993。
6.如權(quán)利要求4或5所述的工程菌的構(gòu)建方法，其特征在于，包括下列步驟：
1)將所述的甘油脫氫酶突變體、啟動子、載體連接獲得重組表達載體；
2)將所述的重組表達載體轉(zhuǎn)化至出發(fā)菌株，得到所述的產(chǎn)二羥基丙酮的工程菌。
7.如權(quán)利要求6所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的載體選自pBBR1MCS-2質(zhì)粒、pBBR1MCS-5質(zhì)粒中的一種或兩種；
和/或，所述的啟動子選自tufB、gdh中的一種或兩種。
8.如權(quán)利要求1或2所述的突變體或如權(quán)利要求3所述的生物材料或如權(quán)利要求4或5所述的工程菌在生產(chǎn)二羥基丙酮中的用途。
9.一種二羥基丙酮的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括如下步驟：采用如權(quán)利要求4或5所述的工程菌，轉(zhuǎn)化生產(chǎn)二羥基丙酮。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述的工程菌以甘油為碳源。
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