[發明專利]一種高酯鍵形成效率分子肽突變體在審
| 申請號： | 202210870801.8 | 申請日： | 2022-07-22 |
| 公開（公告）號： | CN116284278A | 公開（公告）日： | 2023-06-23 |
| 發明（設計）人： | 江凌;陳耀;陳昱金;朱麗英;劉偉 | 申請（專利權）人： | 南京工業大學 |
| 主分類號： | C07K14/315 | 分類號： | C07K14/315;C12N15/31;C12N15/70;C07K1/14;C07K1/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江蘇致邦律師事務所 32230 | 代理人： | 尹妍;徐蓓 |
| 地址： | 211816 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高酯鍵 形成 效率 分子 突變體 | ||
【權利要求書】：
1.一種高酯鍵形成效率分子肽突變體，其特征在于，氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
2.編碼權利要求1所述分子肽突變體的基因序列。
3.權利要求1所述分子肽突變體在蛋白質分離中的應用。
4.權利要求1所述分子肽突變體的純化方法，其特征在于，包括：
（1）將分子肽的基因序列導入載體構建重組質粒，重組質粒導入宿主菌；
（2）將含重組質粒的宿主菌培養至OD600=0.6-0.8，之后加入IPTG誘導；
（3）誘導結束后，取菌液離心后收集菌體，加入磷酸緩沖液重懸，超聲破碎；
（4）破碎液超速離心后取上清液，純化透析獲取純化蛋白。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述（1）中，載體選用pET-22b。
6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，載體連接的酶切位點為
7.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述（1）中，宿主菌為大腸桿菌
8.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述（2）中，含重組質粒的大腸桿菌在LB培養基中培養。
9.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述（4）中，上清液在Ni-NTA樹脂中進行蛋白純化。
10.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，純化后的蛋白在3000?Da的透析袋中透析24-26?h。
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