[發明專利]一種3β-熊去氧膽酸的合成方法

在審

• 申請號: 202210868494.X
• 申請日: 2022-07-22
• 公開（公告）號: CN115011661A
• 公開（公告）日: 2022-09-06
• 發明（設計）人: 曾春玲;孫超;孫浩;李斌;許新華
• 申請（專利權）人: 湖南科瑞生物制藥股份有限公司
• 主分類號: C12P33/06
• 分類號: C12P33/06
• 代理公司: 長沙歐諾專利代理事務所(普通合伙) 43234
• 代理人: 歐穎;梁捷

一種3β?熊去氧膽酸的合成方法，包括以下步驟：1、向反應器中加入叔丁醇或異丙醇、水、緩沖液混合形成體系溶液，再加入葡萄糖和(5β)?3,7?二酮?24?膽酸，繼續加入氫氧化鈉水溶液調節pH為6～8，調節反應溫度為25～35℃，混勻后，加入3β?類固醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、輔酶I和輔酶II，用氫氧化鈉水溶液調節pH為6～8，進行第一次反應，生成中間體；2、向體系溶液中加入7β?類固醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、葡萄糖、輔酶I和輔酶II，用氫氧化鈉水溶液調節pH為6～8，進行第二次反應。本發明操作簡單，反應條件溫和，試劑毒性小，污染小，生產成本低，可操作性強，專一性強，收率高且無明顯副產物。

技術領域

本發明屬于用于藥物用途的活性成分的合成技術領域，具體涉及到一種3β-熊去氧膽酸的合成方法。

背景技術

3β-熊去氧膽酸，又名異熊去氧膽酸，化學名稱是(3β,5β,7β)-3,7-二羥基膽酸((3β,5β,7β)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid)，結構式見式(I)

熊去氧膽酸是一種廣泛應用于治療膽結石、膽汁淤積性肝病、脂肪肝、各型肝炎的藥物。熊去氧膽酸還廣泛應用于醫藥保健品，全球市場需求量大，據統計中國每年以中間體或原料藥形式出口國外達500余噸。

原料藥的有關物質是評價藥品安全性的重要指標，對藥品雜質進行充分研究已成為目前藥品生產研發必不可少的重要環節。3β-熊去氧膽酸是目前動物源熊去氧膽酸制備過程中必定產生的一個雜質之一，合成這一雜質可用做雜質標準品進行雜質標定。

文獻“J.Med.Chem.2014,57,20,8477–8495”，Festa等人，描述了3β-熊去氧膽酸的一種合成路線，其通過以3-甲磺酰熊去氧膽酸甲酯為原料，經醋酸鉀，DMF-水體系回流置換反應，再通過氫氧化鈉，甲醇-水水解制得，收率為56％。

現有的合成3β-熊去氧膽酸的方法較少，且存在產率較低，過程復雜，使用多種有毒危險試劑，成品純化困難等問題。

因此，需要設計一種新的3β-熊去氧膽酸的合成方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種3β-熊去氧膽酸的合成方法，以解決背景技術中提出的現有的合成3β-熊去氧膽酸的方法較少，且存在產率較低，過程復雜，使用多種有毒危險試劑，成品純化困難的問題。

本發明的技術方案是，一種3β-熊去氧膽酸的合成方法，包括以下步驟：

步驟1、向反應器中加入叔丁醇或異丙醇、水、緩沖液混合形成體系溶液，再加入葡萄糖和(5β)-3,7-二酮-24-膽酸，向體系溶液中繼續加入氫氧化鈉水溶液調節pH值為6～8，調節反應溫度為25～35℃，待體系溶液充分混勻后，加入3β-類固醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、輔酶I和輔酶II，并用氫氧化鈉水溶液調節pH值為6～8，進行第一次反應，生成中間體；

步驟2、接著向體系溶液中加入7β-類固醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、葡萄糖、輔酶I和輔酶II，并用氫氧化鈉水溶液調節pH值為6～8，進行第二次反應。

在一種具體的實施方式中，所述步驟1中，第一次反應的反應時間為2～24h，且在第一次反應和第二次反應進行一段時間后均通過薄層色譜法觀察是否完全反應。

在一種具體的實施方式中，所述步驟1中，用氫氧化鈉水溶液調節體系溶液的pH值，將pH值調節至6.5～7.5再進行反應；步驟2中，用氫氧化鈉水溶液調節體系溶液的pH值，將pH值調節至6.5～7.5再進行反應。

在一種具體的實施方式中，所述步驟1中的反應溫度調節為30～35℃。

在一種具體的實施方式中，所述3β-熊去氧膽酸的合成方法還包括步驟01，步驟01在步驟1之前，