[發明專利]一種組培楊樹品種‘森海2號’的方法

有效

• 申請號: 202210854816.5
• 申請日: 2022-07-18
• 公開（公告）號: CN115176704B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 丁莉萍;王宏芝;魏建華;鄭林;陳亞娟
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 莫舒穎

本發明涉及植物組培領域，具體公開了一種組培楊樹品種‘森海2號’的方法，包括如下步驟：S1、將‘森海2號’無菌葉片沿垂直主葉脈方向分為兩段，取近葉柄段剪去邊緣作為外植體接入誘導培養基，誘導培養出愈傷組織，得到帶有愈傷組織的葉片；S2、將步驟S1所述帶有愈傷組織的葉片轉至分化培養基，分化培養出叢生苗；S3、將長至1.0?1.5cm高的叢生苗轉至生根培養基進行生根培養，獲得‘森海2號’組培苗。本發明主要針對楊樹良種‘森海2號’，綜合考慮組培過程中的各個環節，優化組織培養條件，建立了一套適用于‘森海2號’高效組織培養體系。

技術領域

本發明涉及植物組培領域，具體涉及一種組培楊樹品種‘森海2號’的方法。

背景技術

楊樹良種‘森海2號’是通過中國林科院林業研究所胡建軍等人人工控制授粉選育而成，2021年獲得良種審定通過的品種(編號：國S-SV-PS-001-2021)。其父本為青楊，母本為美洲黑楊。青楊派和黑楊派的親緣關系較近，雜交可配性高，是非常優良的雜交組合(胡斌，樊軍鋒，高建設，等.美洲黑楊與青楊、川楊和卜氏楊人工雜交及雜種苗生長和抗病性狀測定[J].浙江林學院學報，2009，26(6)：778-783.)。‘森海2號’具有優良的速生性和材性，但是抗鹽堿和抗病蟲害能力較差。組培再生系統是其種質資源保存利用和基因轉化研究的基礎，楊樹‘森海2號’高效組培再生系統的建立，可為通過根癌農桿菌介導法將耐鹽堿基因或抗蟲基因導入‘森海2號’組內以獲得優良新品種奠定基礎。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何高效地組織培養楊樹良種‘森海2號’。

為解決上述技術問題，本發明提供了一種組培(組織培養)楊樹品種‘森海2號’的方法，包括如下步驟：

S1、將‘森海2號’無菌葉片沿垂直主葉脈方向分為兩段，取近葉柄段剪去邊緣作為外植體接入誘導培養基，誘導培養出愈傷組織，得到帶有愈傷組織的葉片；

S2、將步驟S1所述帶有愈傷組織的葉片轉至分化培養基，分化培養出叢生苗；

S3、將長至1.0-1.5cm高的叢生苗轉至生根培養基進行生根培養，獲得‘森海2號’組培苗；

所述誘導培養基為以MS基本培養基為基礎培養基，向該基礎培養基中添加6-BA、ZT、IBA和2,4-D得到的固體培養基，誘導培養基中6-BA的濃度為0.5mg·L^-1、ZT的濃度為0.25mg·L^-1、IBA的濃度為0.25mg·L^-1、2,4-D的濃度為1.0mg·L^-1；

所述分化培養基為以MS基本培養基為基礎培養基，向該基礎培養基中添加6-BA、ZT和IBA得到的固體培養基，分化培養基中6-BA的濃度為0.5mg·L^-1、ZT的濃度為0.25mg·L^-1、IBA的濃度為0.25mg·L^-1；

所述生根培養基為以1/2MS基本培養基為基礎培養基，向該基礎培養基中添加IBA和NAA得到的固體培養基，生根培養基中IBA的濃度為0.05mg·L^-1、NAA的濃度為0.02mg·L^-1。

上述方法中，所述外植體大小優選為(0.8～1.2)cm×(0.8～1.2)cm。

上述方法中，所述誘導培養的培養條件為溫度24-25℃，黑暗。

上述方法中，所述誘導培養，每2周繼代一次。

上述方法中，所述誘導培養，進行3-4周。

上述方法中，所述分化培養和所述生根培養的培養條件為溫度24-25℃，光照強度1600-2000lux，光照16h/黑暗8h。

上述方法中，所述分化培養，進行3-4周。