[發明專利]一種對植物寄生線蟲高毒殺活性的蠟狀芽胞桿菌及其應用

在審

• 申請號: 202210841985.5
• 申請日: 2022-07-18
• 公開（公告）號: CN115572688A
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 孫明;代大東;聶鑫;姚浩哲;張書榮;鄭金水;彭東海
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P5/00;C05G3/60;C12R1/085
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 強紅剛

本發明屬于微生物技術領域，提供了一種對植物寄生線蟲高毒殺活性的蠟狀芽胞桿菌及其應用。該菌株已于2022年06月15日保藏于中國湖北省武漢市洪山區武漢大學中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCCNO：M2022893。本發明分離的菌株對南方根結線蟲等根結線蟲屬及大豆孢囊線蟲等孢囊線蟲屬具有高毒殺作用，可用于根結線蟲與孢囊線蟲病害的生物防治。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體而言，涉及一種新菌株，尤其涉及一種對植物寄生線蟲高毒殺活性的蠟狀芽胞桿菌及其應用。

背景技術

線蟲門是動物界中最大的門之一，數量豐度巨大，在土壤和淡水等環境中隨處可見，甚至在極端環境中也有它們的存在，可寄生生活在動植物上，或者自由生活在土壤和淡水中。目前，世界上危害最大的十種植物寄生線蟲中，排名第一的為根結線蟲屬。根結線蟲宿主范圍十分廣泛，可以侵染幾乎所有的瓜果蔬菜，被根結線蟲侵染的植物會在根上形成根結，導致植株矮小、葉片發黃，甚至導致植株死亡。根結線蟲病害嚴重威脅了農業生產，造成了大量經濟作物減產。

根結線蟲主要分布在3-10厘米的表層土壤中，現有的防治方法主要包括利用輪作種植、換茬時采取火燒、水淹及高溫燜棚方式對線蟲進行鏟除，但無法達到根治的效果，仍對農民經濟效收入造成了一定的損失。目前應用最廣泛的方法是在種植之前用化學農藥對土壤進行噴灑，達到提前防治的目的。然而，該方法對化學農藥的噴灑量要求很高，長時間應用化學農藥不僅對土壤土質造成影響，還會引起線蟲對農藥的抗性，導致防治效果越來越差。

目前，生物農藥由于其安全低毒、效果好，不易引起害蟲抗性，對環境友好等優點成為了新型農藥的研究熱點。

發明內容

鑒于現有技術存在的不足，本發明的第一個目的在于提供一株對植物寄生線蟲高毒殺活性的生防菌，該菌株對南方根結線蟲等根結線蟲屬具有高毒殺作用，可用于根結線蟲病害的生物防治。

為了實現上述技術目的，本發明人在溫室反復重茬種植的番茄盆栽中，意外地發現所繁殖的線蟲在孵化后出現集體死亡的現象，基于此發現，發明人在進一步的研究中分離出一株對定棲性植物寄生線蟲具有高毒殺活性的菌株，通過分子生物學實驗和基因組測序后，確定該菌株為芽胞桿菌屬，具體為蠟狀芽胞桿菌(Bacillus cereus)，并命名為BMB2600。該菌株已于2022年6月15日保藏于中國湖北省武漢市洪山區武漢大學中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO：M 2022893。

需要說明的是，本發明分離得到的蠟狀芽胞桿菌(Bacillus cereus)BMB2600具有如下形態學特征和培養特征：

形態學特征：蠟樣芽胞桿菌BMB2600為革蘭氏陽性桿菌，1.0～1.2×3.0～5.0μm，兼性需氧，產芽孢，芽孢圓形或柱形，菌體細胞兩端較平整，多數呈鏈狀。菌落大，表面粗糙，扁平，不規則。

培養特征：該菌株在含有葡萄糖的培養基中發酵培養后，能產生代謝物丙烯酸，且發酵液對植物寄生線蟲產生高殺蟲活性，尤其對根結線蟲及孢囊線蟲有很高的毒殺活性。

另外，本發明的第二個目的在于提供一株蠟狀芽胞桿菌的應用，即上述的蠟狀芽胞桿菌(Bacillus cereus)BMB2600在防治植物寄生線蟲病害中的應用。以及，上述蠟狀芽胞桿菌的發酵液在制備防治植物寄生線蟲病害的生物農藥和/或生物有機肥中的應用。優選地，所述的植物寄生線蟲選自如下的一種或兩種以上：根結線蟲屬、孢囊線蟲屬。進一步優選地，所述的根結線蟲屬為南方根結線蟲，所述的孢囊線蟲屬為大豆孢囊線蟲。

最后，本發明的第三個目的在于提供一種對植物寄生線蟲高毒殺活性的制劑，該制劑的活性成分由上述蠟狀芽胞桿菌(Bacillus cereus)BMB2600的發酵液制備而成。

與現有技術相比，本發明提供的蠟狀芽胞桿菌BMB2600具有如下優點和顯著進步：

(1)該菌株對南方根結線蟲和大豆孢囊線蟲有高毒殺作用。