[發明專利]一種不規則毛霉生長抑制劑的應用及實驗方法

在審

• 申請號: 202210803548.4
• 申請日: 2022-07-07
• 公開（公告）號: CN115463214A
• 公開（公告）日: 2022-12-13
• 發明（設計）人: 梁官釗;張美潔;劉維達;梅嬛
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院皮膚病醫院（中國醫學科學院皮膚病研究所）
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61P31/10;C12Q1/18
• 代理公司: 蘇州銘浩知識產權代理事務所(普通合伙) 32246
• 代理人: 于浩江

本發明提供了二酰甘油激酶(diacylglycerol kinase，DGKs)抑制劑的新的應用方式；并通過使用對DGK?ε有抑制作用的I型DGK抑制劑來實現對高溫條件下不規則毛霉菌株DGKs同工酶的抑制，比較分析不規則毛霉處理前后的生長情況，揭示DGKs在不規則毛霉生長差異性中的作用，證明DGK抑制劑有進一步開發為臨床不規則毛霉感染患者所用的潛能；為DGK抑制劑在不規則毛霉的生長實驗領域的應用提供了新的思路并打下基礎。

技術領域

本發明涉及一種不規則毛霉生長抑制劑的應用及實驗方法，屬于醫學真菌學技術領域。

背景技術

二酰甘油激酶(diacylglycerol kinase，DGKs)在哺乳動物方面的研究已較為全面，目前主要發現有10個DGK同工酶，包括-α， -β，-γ，-δ，-ε，-ζ，-η，-θ，-ι和-κ，在多種信號轉導途徑中發揮著關鍵作用，主要涉及細胞發育、神經和免疫反應、細胞骨架重組和腫瘤發生。目前有兩種可用的商品化試劑有I型DGKs抑制劑(R59022)和I I型DGKs抑制劑(R59949)，對不同類型同工酶產生不同程度的抑制作用。同時，DGKs可參與調控脂質代謝，通過磷酸化二酰甘油(diacylglycerol，DAG)促進磷脂酸(phosphat i di c ac id，PA)的生成參與調節脂質水平，DAG和PA作為影響細胞轉錄、細胞膜增殖和生長的重要信號分子，在真核生物的合成生長中發揮著重要的作用。

申請人早期關于不規則毛霉對抗低氧壓力的轉錄組分析也發現，脂質代謝在不規則毛霉菌株對抗低氧壓力中同樣發揮著重要作用。

發明內容

針對上述存在的技術問題，本發明的目的是：提出了一種不規則毛霉生長抑制劑的應用及實驗方法。

本發明的技術解決方案是這樣實現的：一種不規則毛霉生長抑制劑的應用，將二酰甘油激酶(diacylglycerol kinase，DGKs)抑制劑應用于不規則毛霉的生長抑制。

一種不規則毛霉生長抑制劑的實驗方法，包含以下步驟：

①配置DGK抑制劑母液；

②在不同濃度的的抑制劑環境中分別培養不規則毛霉菌株；

③監測不規則毛霉菌株的生長情況；

④檢測不規則毛霉脂質代謝情況。

優選的，所述步驟①中，配置DGK抑制劑母液的過程為：

稱取1mg二酰基甘油激酶抑制劑I(DGKi I)固體，分子質量為 459.58g/mol，加入108.79μl DMSO充分溶解至澄清透亮液體，即得 20mM DGKi I保存母液待用。

優選的，所述步驟②中，不同濃度的的抑制劑分別為15μM、30μM、 60μM和120μM的DGKi I。

優選的，所述步驟③中，當同一種菌株在同一溫度下的任意一組孢子完全進入菌絲狀態，則停止監測。

由于上述技術方案的運用，本發明與現有技術相比具有下列優點：

本方案提供了二酰甘油激酶(diacylglycerol kinase，DGKs) 抑制劑的新的應用方式；并通過使用對DGK-ε有抑制作用的I型DGK 抑制劑來實現對高溫條件下不規則毛霉菌株DGKs同工酶的抑制，比較分析不規則毛霉處理前后的生長情況，揭示DGKs在不規則毛霉生長差異性中的作用，證明DGK抑制劑有進一步開發為臨床不規則毛霉感染患者所用的潛能；為DGK抑制劑在不規則毛霉的生長實驗領域的應用提供了新的思路并打下基礎。

附圖說明