[發明專利]一種小鼠自身免疫性甲狀腺炎模型的構建方法

在審

• 申請號: 202210795799.2
• 申請日: 2022-07-07
• 公開（公告）號: CN115362984A
• 公開（公告）日: 2022-11-22
• 發明（設計）人: 陸華;李方遠;張琦;譚沛;李小青;陳仁;劉芊辰
• 申請（專利權）人: 成都中醫藥大學;華潤三九現代中藥制藥有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61K49/00
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 肖柯岑;全學榮

本發明提供了一種小鼠自身免疫性甲狀腺炎模型的構建方法，包括如下步驟：(1)對小鼠注射豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑2周，每周2次，每次0.15～0.25mL；(2)對小鼠注射豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑9～13周，每周2次，每次0.15～0.25mL，同時飼喂濃度為0.6～0.8g/L的高碘水；所述豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑是含有濃度為0.4～0.6mg/mL的豬甲狀腺球蛋白的乳化劑。本發明方法成功制備了昆明雌鼠自身免疫性甲狀腺炎(EAT)模型，縮短了造模成功時間且造模成功率高，死亡率低，模型貼近正常人罹患自身免疫性甲狀腺炎的病理過程，且可在不同時間窗取材以較全面的反映其病理變化，為模擬正常人罹患自身免疫性甲狀腺炎的進一步藥效學研究奠定基礎。

技術領域

本發明屬于動物模型制備領域，具體涉及一種小鼠自身免疫性甲狀腺炎 模型的構建方法。

背景技術

自身免疫性甲狀腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)，又稱橋本氏甲狀腺炎(hashimoto thyroiditis，HT)，是一種常見的器官特異性自身免疫性疾病。自 身免疫性甲狀腺炎以甲狀腺濾泡細胞破壞、慢性淋巴細胞浸潤、甲狀腺腫 或腺體萎縮，及血清中存在高滴度的甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、甲狀 腺球蛋白抗體(TGAb)為特征。目前關于自身免疫性甲狀腺炎的發病原因尚未 完全清楚。可能由遺傳易感因素、表觀遺傳效應、免疫紊亂、以及各種環境 觸發因素(例如碘攝入過量、感染)等，更多地認為其是由易感基因和環境 因素之間錯綜復雜的相互作用觸發。其中高碘是公認的主要環境誘發因素， 碘攝入過量不僅增加自身免疫性甲狀腺炎的發生，還增加自身免疫性甲 狀腺炎發展為甲狀腺功能減退的風險。目前國際上建立實驗性自身免疫 性甲狀腺炎(EAT)小鼠模型多采用具有先天性免疫缺陷的非肥胖糖尿 病小鼠(Non Obese Diabetes，NOD)近交系小鼠，通過高碘喂養誘發， 模擬自身免疫性甲狀腺炎免疫缺陷與高碘環境綜合觸發的病理過程。但 這類疾病模型難以模擬正常人患自身免疫性甲狀腺炎的情形，不利于進 行正常人罹患自身免疫性甲狀腺炎的研究。

正常昆明小鼠尚未發現自身免疫性甲狀腺炎的易感基因，可以模擬 正常人患自身免疫性甲狀腺炎。目前僅有少量文獻報道了采用免疫誘導 配合高碘水喂養建立昆明小鼠的實驗性自身免疫性甲狀腺炎(EAT)模 型，例如葉登美等人報道了多點皮下及肌肉注射抗原免疫乳化劑(濃度 0.25mg·ml^-1)0.2ml/(只·周·次)，構建小鼠自身免疫性甲狀腺炎模型的方 法，但其造模時間較長，成本較高(葉登美,王萍,陳京,董群.小鼠自身免 疫性甲狀腺炎模型構建[J].皖南醫學院學報,2015,34(01):10-12)。

僅此，進一步探索昆明小鼠自身免疫性甲狀腺炎模型的制備方法， 在保證造模成功率的同時降低飼養成本，仍具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種。

本發明提供了一種小鼠自身免疫性甲狀腺炎模型的構建方法，包括如下 步驟：

(1)對小鼠注射豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑2周，每周2次，每次 0.15～0.25mL；

(2)對小鼠注射豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑9～13周，每周2次，每次0.15～0.25mL，同時飼喂高碘水；

所述豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑是含有濃度為0.4～0.6mg/mL的豬甲狀 腺球蛋白的乳化劑；

所述高碘水的碘濃度為0.6～0.8g/L。

進一步地，步驟(1)和/或步驟(2)中所述每次注射甲狀腺球蛋白免疫 乳化劑的劑量為0.2mL。

進一步地，上述豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑是含有濃度為0.5mg/mL的 豬甲狀腺球蛋白的乳化劑。

更進一步地，上述豬甲狀腺球蛋白免疫乳化劑是含有濃度為0.8～1.2 mg/mL豬甲狀腺球蛋白的PBS緩沖液與等體積的弗氏不完全佐劑制成的乳 化劑。