[發明專利]miR-5189-3p在頭頸部鱗癌診療中的應用

有效

• 申請號: 202210772486.5
• 申請日: 2022-06-30
• 公開（公告）號: CN115074444B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 單春光;賈巧靜;王建星;婁丹
• 申請（專利權）人: 河北醫科大學第二醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K31/7105;A61P35/00;A61P35/04;G16B40/10;G16H50/30
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 朱萍

本發明公開了miR?5189?3p在頭頸部鱗癌診療中的應用。本發明實驗發現，與正常人相比，miR?5189?3p在頭頸部鱗癌患者中的表達水平明顯下調；通過細胞增殖、遷移和侵襲實驗發現，miR?5189?3p過表達可抑制頭頸部鱗癌細胞的增殖，遷移和侵襲，表明miR?5189?3p能夠應用于頭頸部鱗癌的診斷和治療，具有較好的臨床應用價值。

背景技術

miRNA是一種長度為19-22個核苷酸的非編碼單鏈RNA。它們通過沉默mRNA來發揮作用，從而在轉錄后水平調節基因的表達。miRNA的合成首先是由miRNA編碼基因轉錄出pri-miRNA，隨后由RNaseⅢ家族成員Drosha將pri-miRNA剪切成為長度大約為80bp的發卡結構的pre-miRNA，也是miRNA前體。最后，pre-miRNA在細胞質中被RNaseⅢ家族成員Dicer加工成雙鏈的RNA。其中一條則與RNA沉默復合物(RNA-induced?silencing?complex，RISC)結合形成了RISC-miRNA復合物，隨后再次結合到靶基因的mRNA的3’UTR來調控靶標。隨著近期生物信息學在miRNA領域應用逐步推廣和深入，科學家應用生物信息學軟件對miRNA的機制進行分析，顯示許多miRNA調控靶點位于與細胞癌變密切相關的腫瘤調控因子或通路上，這對于腫瘤病因學的研究具有重要意義。目前，關于頭頸部鱗癌診斷的miRNA生物標志物的報道鮮見，臨床治療上需要有利于頭頸部鱗癌診斷的miRNA分子的標志物。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種生物標志物miR-5189-3p在頭頸部鱗癌診斷和治療中的應用，以實現頭頸部鱗癌的診斷和治療，進一步提高患者的生存質量和生存率。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

本發明一方面提供了一種用于診斷頭頸部鱗癌的生物標志物，所述生物標志物包括pri-miR-5189、pre-miR-5189、miR-5189-3p。

進一步，所述生物標志物為miR-5189-3p。

在本發明中，術語“miRNA”具有其在本領域中的普通含義，表示來自遺傳基因位點的RNA分子，其從可以形成局部RNA前體miRNA結構的轉錄物加工而來。成熟miRNA通常長度為20、21、22、23、24或25個核苷酸，盡管其它數目的核苷酸也可存在，例如18、19、26或27個核苷酸。

miRNA編碼序列具有與側翼基因組序列配對的潛力，使成熟miRNA放置在非完全配對的RNA雙鏈體之內(本文也稱作莖-環或發夾結構或pre-miRNA)，所述雙鏈體作為從更長的前體轉錄物進行miRNA加工的中間體。這一加工典型地通過分別稱為Drosha和Dicer的兩種特定的內切核酸酶的連續作用而發生。Drosha從初級轉錄物(本文也稱作“pri-miRNA”)產生典型地折疊成發夾或莖-環結構的miRNA前體(本文也稱作“pre-miRNA”)。采用Dicer方法切割這個miRNA前體可以得到miRNA雙鏈體，其發夾或莖-環結構的一條臂包含成熟miRNA，另一條臂包含類似大小的節段(通常稱為miRNA*)。

本發明另一方面提供了檢測所述的生物標志物表達水平的試劑在制備診斷頭頸部鱗癌的產品中的應用，所述試劑包括特異性識別前面所述的生物標志物的寡核苷酸探針、特異性擴增前面所述的生物標志物的引物。

在本發明中，術語“探針”是指對應于能夠特異性結合mRNA的數個堿基至數百個堿基的核酸片段，例如RNA或DNA等。由于被標記，因而可以確認是否存在特定的mRNA。探針能夠以寡核苷酸(oligonucleotide)探針、單鏈DNA(single?stranded?DNA)探針、雙鏈DNA(double?stranded?DNA)探針、RNA探針等形式制造。在本發明中，利用與上述標志物基因互補的探針進行雜交，并且可通過是否雜交來診斷上述基因的表達水平。可以基于本技術領域中公知的技術來更改用于合適探針的選擇及雜交條件，在本發明中，對此沒有特別限制。