[發明專利]一種分泌抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體的雜交瘤細胞株R1g1 4B4及應用

在審

• 申請號: 202210750559.0
• 申請日: 2022-06-29
• 公開（公告）號: CN115505574A
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發明（設計）人: 張煉輝;陳夢夢;王建和;吳曉妍;周筱帆;陳群一
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/12;G01N33/569;G01N33/577;A01N37/46;A01P1/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明公開了一種分泌抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體的雜交瘤細胞株R1g1 4B4及應用，所述雜交瘤細胞株R1g1 4B4于2022年保藏在中國典型培養物保藏中心CCTCC，保藏編號為CCTCC NO：C2022146，保藏地址：中國.武漢.武漢大學。本發明得到的雜交瘤細胞株R1g1 4B4分泌的抗CLas分泌蛋白R1g的單克隆抗體mAb 4B4能夠識別柑橘黃龍病菌分泌蛋白R1g，通過免疫印跡反應證明單克隆抗體mAb 4B4可以特異地識別病原菌CLas的分泌蛋白R1g1。該單克隆抗體mAb 4B4可用于制備抑制或控制柑橘黃龍病的制劑、藥物，從而實現防治柑橘黃龍病。

技術領域

本發明涉及柑桔黃龍病技術領域，具體地，涉及一種分泌抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體的雜交瘤細胞株R1g1 4B4及單克隆抗體和應用。

背景技術

柑桔黃龍病是一種毀滅性的柑桔病害，在全世界范圍內造成巨大的經濟損失。柑桔植株感染黃龍病之后，葉片萎縮掉落，結實率下降，果實偏小，顏色黃綠不均，最終導致植株死亡，且柑桔黃龍病傳播性極強，短期內可蔓延整個果園。柑桔黃龍病的病原菌是革蘭氏陰性細菌，其具有三種致病變種，分別為亞洲種Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)、非洲種Candidatus Liberibacter africa nus(CLaf)、美洲種CandidatusLiberibacter americanus(Clam)。目前針對柑桔黃龍病尚無有效的治療措施和理想的抗性品種，因此開發高效的黃龍病防治方法，控制黃龍病、及降低黃龍病的發生是當前應對黃龍病的主要方向。

目前并無有效阻斷柑桔黃龍病的方法，單克隆抗體在植物病原菌中的應用起步較早，其試材的同質性和均一特異性的優點，為植物病原細菌學中細菌種、小種或系統特異抗體的制作開辟了道路，不僅替代了病害診斷和細菌檢出中的多克隆抗體，而且有希望應用于細菌的生理生化及控制研究中。因此，研發能檢測黃龍病病原菌分泌蛋白的單克隆抗體，可用于開發的黃龍病檢測試紙，有利于控制黃龍病的發生和蔓延。目前，相關專利CN201810132721.6和CN201810132890.X分別報道過針對CLas McAb2和McAb1膜表面蛋白，設計了雜交瘤細胞株并得到其單克隆抗體。但柑橘黃龍病菌的分泌蛋白有很多種，以哪種外分泌蛋白作為抗原制作單克隆抗體檢測或阻斷柑橘黃龍病菌的效果最好未見報道，且目前還尚未有針對柑橘黃龍病病菌亞洲種(CLas)分泌蛋白R1g(WP_015452585.1)的單克隆抗體方面的研究報道。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供一種分泌抗CLas分泌蛋白R1g 單克隆抗體的雜交瘤細胞株R1g1 4B4及單克隆抗體和應用。

本發明的第一個目的是提供一種分泌抗CLas分泌蛋白R1g的單克隆抗體的雜交瘤細胞株R1g1 4B4。

本發明的第二個目的是提供一種抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體mAb 4B4。

本發明的第三個目的是提供所述的雜交瘤細胞株R1g1 4B4和/或所述抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體mAb 4B4在制備檢測柑橘黃龍病菌CLas的R1g蛋白的藥物、制劑和/ 或試劑盒中的應用。

本發明的第四個目的是提供所述的雜交瘤細胞株R1g1 4B4和/或所述抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體mAb 4B4在制備抑制柑橘黃龍病菌CLas和/或柑橘黃龍病的制劑和/或藥物中的應用。

本發明的第五個目的是提供所述的雜交瘤細胞株R1g1 4B4和/或所述抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體mAb 4B4在制備防治柑橘黃龍病菌CLas和/或柑橘黃龍病的制劑和/或藥物的應用。

本發明的第六個目的是提供所述的雜交瘤細胞株R1g1 4B4和/或所述抗CLas分泌蛋白R1g單克隆抗體mAb 4B4在制備柑橘黃龍病檢測藥物、制劑和/或試劑盒中的應用。