[發(fā)明專利]靶向人LILRB2的納米抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210738679.9
• 申請(qǐng)日: 2022-06-28
• 公開（公告）號(hào): CN114805568B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 焦莎莎;王榮娟;毛冠凡;張暢;王雙;張錦超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京科諾信誠(chéng)科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/18
• 分類號(hào): C07K16/18;C07K19/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種抗LILRB2的納米抗體、編碼所述納米抗體的核酸、包含所述核酸的表達(dá)載體、包含所述納米抗體的藥物組合物、以及制備藥物的用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于抗體工程領(lǐng)域，具體涉及一種用于診斷或治療腫瘤的治療性單域抗體，特別是涉及一種抗LILRB2的納米抗體、其衍生蛋白以及用于制備藥物的用途。

背景技術(shù)

納米抗體是目前最小的抗體分子，最初由比利時(shí)科學(xué)家Hamers在駱駝血液中發(fā)現(xiàn)，它是工程化抗體產(chǎn)品中備受關(guān)注的一類。納米抗體主要優(yōu)點(diǎn)：一是體積是普通抗體的1/10，因?yàn)轶w積小，其在動(dòng)物組織體內(nèi)的穿透力強(qiáng)，如，可以通過人體的腦組織，可以達(dá)到高密度的腫瘤內(nèi)部，而普通抗體卻不能，這使得可以通過納米抗體來治療某些腫瘤或腦部疾??；二是抗原特異性好；三是易于基因改造，方便人工改造以獲得對(duì)抗不同病原的抗體；四是穩(wěn)定性高，如，納米抗體在體內(nèi)不被自然分解的時(shí)間比普通抗體長(zhǎng)（意味著藥效時(shí)間更持久），納米抗體甚至能從人胃中通過而保持有效性。

LILRB2，又稱ILT4，主要在髓系細(xì)胞上表達(dá)，包括單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞?；?qū)W研究顯示多種腫瘤微環(huán)境中的腫瘤關(guān)聯(lián)巨噬細(xì)胞（TAM）高表達(dá)LILRB2，抑制LILRB2（小鼠的對(duì)應(yīng)蛋白叫Pirb）降低Treg和MDSC在腫瘤組織的侵入。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示Pirb抗體抑制抑制腫瘤生長(zhǎng)，并與PD-1抗體有協(xié)同作用。LILRB2主要在骨髓細(xì)胞表達(dá)、其它組織表達(dá)有限，這令on-target、off-tissue毒性比較輕微。人LILRB2是髓細(xì)胞成熟過程中重要的穩(wěn)態(tài)表面調(diào)節(jié)因子，是一種有前途的、專門針對(duì)髓細(xì)胞功能測(cè)定的髓免疫檢查點(diǎn)靶點(diǎn)，具有重要的治療價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

現(xiàn)有技術(shù)中的ScFv、Fab或全I(xiàn)gG類抗LILRB2抗體分子，結(jié)構(gòu)復(fù)雜、分子較大，雖然能將活性分子連接到LILRB2上，但影響活性分子的功能、方法復(fù)雜、負(fù)載效率也較低；納米抗體分子較小、易于操作，但人源化程度低、親和力不高，延長(zhǎng)半衰期的性能有待進(jìn)一步提高。

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一系列抗人LILRB2納米抗體序列及制備方案。

第一方面，本發(fā)明提供一種抗LILRB2的納米抗體，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，

所述納米抗體能夠特異性結(jié)合LILRB2，且所述納米抗體中的VHH鏈的互補(bǔ)決定區(qū)CDR為選自下組的一種或多種：

（1）SEQ ID NO：14所示的CDR1，SEQ ID NO：15所示的CDR2，和SEQ ID NO：16所示的CDR3；

（2）SEQ ID NO：17所示的CDR1，SEQ ID NO：18所示的CDR2，和SEQ ID NO：19所示的CDR3；

（3）SEQ ID NO：20所示的CDR1，SEQ ID NO：21所示的CDR2，和SEQ ID NO：22所示的CDR3；

（4）SEQ ID NO：23所示的CDR1，SEQ ID NO：21所示的CDR2，和SEQ ID NO：24所示的CDR3；

（5）SEQ ID NO：25所示的CDR1，SEQ ID NO：26所示的CDR2，和SEQ ID NO：27所示的CDR3。

（6）SEQ ID NO：28所示的CDR1，SEQ ID NO：29所示的CDR2，和SEQ ID NO：30所示的CDR3。

（7）SEQ ID NO：31所示的CDR1，SEQ ID NO：32所示的CDR2，和SEQ ID NO：33所示的CDR3。

（8）SEQ ID NO：34所示的CDR1，SEQ ID NO：35所示的CDR2，和SEQ ID NO：36所示的CDR3。