[發(fā)明專利]一株植物乳桿菌HSF-LAB-1303及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210738203.5
• 申請日: 2022-06-27
• 公開（公告）號: CN115261262B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設計）人: 劉昌財;楊璐;郭建琦;牛永潔;孟永宏
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西海斯夫生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/00;C12P1/04;A23L33/135;A23L33/10;C12R1/25;C12R1/89
• 代理公司: 北京君智知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11305
• 代理人: 黃綠雯

1.一株植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)HSF-LAB-1303，該菌株已于2022年05月09日在北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC?No.24866。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物乳桿菌HSF-LAB-1303在螺旋藻發(fā)酵中用途。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于螺旋藻發(fā)酵的步驟如下：

A、菌種活化

保存植物乳桿菌HSF-LAB-1303菌株用滅菌生理鹽水稀釋，再涂布在MRS培養(yǎng)基平板上，在恒溫震蕩搖床中在溫度37℃下培養(yǎng)1.5天，生長出表面光滑、凸起、邊緣整齊、直徑2.9～3.1mm的乳白色單菌落；

B、種子培養(yǎng)

使用接種環(huán)挑取步驟A得到的一個單菌落，接種于50ml滅菌的MRS肉湯培養(yǎng)基中，在恒溫震蕩搖床中在溫度36℃與轉(zhuǎn)速120r/min的條件下培養(yǎng)24h，然后使用紫外分光光度計測定在波長600nm處的OD值為3.52時就得到種子培養(yǎng)液；

C、擴大培養(yǎng)

按照以毫升計種子培養(yǎng)液與以毫升計MRS肉湯培養(yǎng)基的比1：10，將種子培養(yǎng)液接種到MRS肉湯培養(yǎng)基中，在恒溫震蕩搖床中在溫度36℃與轉(zhuǎn)速120r/min的條件下培養(yǎng)24h，然后使用紫外分光光度計測定在波長600nm處的OD值為3.52時就得到擴大種子培養(yǎng)液；

D、螺旋藻發(fā)酵

按照以克計螺旋藻與以毫升計蒸餾水的比1：5，把螺旋藻加到蒸餾水中配制成螺旋藻發(fā)酵培養(yǎng)基，然后按照以克計螺旋藻與以毫升計擴大種子培養(yǎng)液的比2:1，再加入擴大種子培養(yǎng)液，在恒溫震蕩搖床中在溫度36℃與轉(zhuǎn)速120r/min的條件下培養(yǎng)5天，得到螺旋藻發(fā)酵液，得到的螺旋藻發(fā)酵液在菌種保藏真空冷凍干燥機中在溫度-80℃下進行凍干處理，得到螺旋藻發(fā)酵產(chǎn)物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于在步驟A中，保存植物乳桿菌HSF-LAB-1303菌株與滅菌生理鹽水的體積比1:100000。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于在步驟A中，MRS培養(yǎng)基平板制備方法如下：

把200mlMRS培養(yǎng)基裝到500ml錐形瓶中，使用立式蒸汽壓力滅菌鍋在溫度121℃下滅菌15min，滅菌培養(yǎng)基與一次性培養(yǎng)皿放到超凈工作臺中進行紫外滅菌25min，待MRS培養(yǎng)基溫度降低到40℃時倒入培養(yǎng)皿中，冷卻至室溫，得到MRS培養(yǎng)基平板。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于在步驟B中，在250ml錐形瓶中的MRS肉湯培養(yǎng)基在立式蒸汽壓力滅菌鍋中在溫度121℃下滅菌15min，得到滅菌的MRS肉湯培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于恒溫震蕩搖床是HZC-250、HZQ-F160、HZQ-X100或THZ-22型恒溫震蕩搖床。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于紫外分光光度計是UV2100、UV2600A、UV2600或UV2802型紫外分光光度計。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述螺旋藻發(fā)酵產(chǎn)物的DPPH自由基清除率為97.7％以上、羥基自由基清除率為92.4％以上、超氧陰離子清除率為33.5％以上、總還原力82.5％以上與亞鐵離子螯合率51.2％以上。