[發明專利]臨床血液免疫細胞的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202210729772.3
• 申請日: 2022-06-24
• 公開（公告）號: CN115124619B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 王正好;趙理
• 申請（專利權）人: 廣東齊美醫藥生物科技集團有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N5/0783;C12N5/0786;A61K39/395;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 南京中高專利代理有限公司 32333
• 代理人: 盧丹丹

1.一種β-catenin單克隆抗體，其特征在于該抗體為β-catenin-2D13，該單抗的輕鏈可變區序列為：

DIVITQRPALMAASPGEKVTITCAEYKHHAELGHVWYQQKSGISPKPWIYRSFIYKGGVPARFSGSGSGTSYSLTITSMEAEDAATYYCNTWDWFTLPFGAGTKLELK

重鏈可變區序列為：

EVQLEESATELARPGASVKLSCKASGYIFSFPGFNWIKQRPGQGLEWIGPGLQRLFHHCCFDMRWGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCAGPDDVCQHWGLGTTLAVSS。

2.如權利要求1所述的β-catenin單克隆抗體在制備用于治療肺癌的藥物組合物中的用途。

3.如權利要求2所述的用途，其特征在于所述組合物中還含有藥學上可接受的載體。

4.如權利要求3所述的用途，其特征在于所述載體還含有防腐劑。

5.NK細胞聯合β-catenin單克隆抗體在制備用于治療癌癥肺癌的藥盒中的用途；其中，β-catenin單克隆抗體為β-catenin-2D13，該單抗的輕鏈可變區序列為：

DIVITQRPALMAASPGEKVTITCAEYKHHAELGHVWYQQKSGISPKPWIYRSFIYKGGVPARFSGSGSGTSYSLTITSMEAEDAATYYCNTWDWFTLPFGAGTKLELK

重鏈可變區序列為：

EVQLEESATELARPGASVKLSCKASGYIFSFPGFNWIKQRPGQGLEWIGPGLQRLFHHCCFDMRWGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCAGPDDVCQHWGLGTTLAVSS；

其中NK細胞的制備方法為：分離外周血單核細胞，以無血清的PRMI-1640培養基懸浮沉淀細胞加入到先包被羊抗鼠IgG于塑料平皿中，用含1％FCS的PBS室溫下封閉15分鐘，再用PBS洗3次，將與anti-CD3孵育2h的細胞加入包被好的平皿中，4℃2h，輕吸細胞懸液，用NKMACS?GMP培養基培養基重懸單核細胞，加入重組人IL-2和IL-15，混勻后注射入小培養袋中，置于37℃孵箱靜置培養；第3天，補充入半量的NK?MACS?GMP培養基和半量的重組人IL-2和IL-15，混勻后繼續培養；第4天，把小培養袋中的培養液平均分配到兩個大培養袋中繼續培養，每3天向每個大培養袋中補充NK?MACS?GMP培養液和重組人IL-2，總共培養14d，即收集獲得增殖后的NK細胞。

6.如權利要求5所述的用途，其特征在于所述β-catenin單克隆抗體本身為藥物組合物的形式，其含有藥學上可接受的載體。

7.如權利要求6所述的用途，其特征在于所述載體還含有防腐劑。