[發明專利]一種分析牛蒡根中功能成分的空間分布的方法

在審

• 申請號: 202210722528.4
• 申請日: 2022-06-24
• 公開（公告）號: CN115060786A
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發明（設計）人: 陳鏘;張超杰;鄭振佳;李玲玉
• 申請（專利權）人: 山東博德醫藥研究院有限公司
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 王寧寧

本發明公開了一種分析牛蒡根中功能成分的空間分布的方法，涉及分析檢測技術領域。包括以下步驟：首先利用包埋劑將牛蒡根進行包埋，經冷凍處理后切片，得到牛蒡根組織切片，并進行真空干燥處理；然后對牛蒡根組織切片進行基質噴涂；之后將噴涂有基質的牛蒡根組織切片進行MALDI質譜成像分析，得到牛蒡根中功能成分的空間分布；所用的基質為DHAP。本發明通過優化MALDI?MSI基質，在負離子檢測模式下，利用MALDI?MSI分析法，建立了牛蒡根中化學成分的高覆蓋、可視化的質譜成像方法，實現了牛蒡根中糖類、有機酸類和黃酮類化合物的可視化表征，為牛蒡成分的開發及綜合利用提供了新的技術支持。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，特別是涉及一種分析牛蒡根中功能成分的空間分布的方法。

背景技術

牛蒡(Arctium lappa L.)，又名惡實、鼠黏、大力等，多為菊科牛蒡屬二年生植物，其根、莖、葉、果實均可入藥。《名醫別錄》記載，牛蒡根莖治“傷寒、寒熱、消渴等，久服輕身耐老”，現代研究發現，牛蒡根富含菊糖、纖維素、多酚類、黃酮類、氨基酸類等多種化學成分，具有降血糖、抗衰老、改善便秘等多種藥理作用。同時，它也被用作開發營養保健食品，并深受消費者歡迎。因此，開展牛蒡根化學成分的研究，對于闡明其功能成分作用機制有重要意義。

目前，國內外學者常采用液相/氣相色譜-質譜聯用、高速逆流色譜、離子色譜等多種分析技術對功能成分進行表征，具有準確度高、重現性好、線性范圍寬等優點。然而，這些技術存在前處理復雜、耗時、破壞重要代謝物的空間分布信息等缺陷，無法實現植物內源性成分的原位表征。

發明內容

本發明的目的是提供一種分析牛蒡根中功能成分的空間分布的方法，以解決上述現有技術存在的問題，牛蒡根中糖類、有機酸類和黃酮類化合物的可視化表征，為牛蒡成分的開發及綜合利用提供技術支持。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種分析牛蒡根中功能成分的空間分布的方法，包括以下步驟：

(1)樣品制備：利用包埋劑將牛蒡根進行包埋，經冷凍處理后切片，得到牛蒡根組織切片，并進行真空干燥處理；

(2)基質噴涂：將真空干燥處理后的牛蒡根組織切片進行基質噴涂，得到噴涂有基質的牛蒡根組織切片；

(3)將噴涂有基質的牛蒡根組織切片進行MALDI質譜成像分析，得到牛蒡根中功能成分的空間分布；

步驟(2)中進行基質噴涂所用的基質為DHAP。

進一步地，所述包埋劑為OCT包埋劑。

進一步地，步驟(1)中冷凍處理的溫度為-20±2℃，時間為40±10min。優選溫度為-20℃，時間為40min。

進一步地，步驟(2)中噴涂密度為0.0025±0.0005mg/mm²；噴涂循環次數為18±4次。優選噴涂密度為0.0025mg/mm²；噴涂循環次數為18次。

進一步地，基質噴涂的噴嘴溫度為60±2℃，優選為60℃。

進一步地，MALDI質譜成像分析所檢測的質荷比為100～1500。

進一步地，MALDI質譜成像分析時的樣品掃描分辨率為50～200μm，優選為100μm。

進一步地，所述功能性成分包括糖類、有機酸類和黃酮類化合物。

本發明公開了以下技術效果：

本發明通過優化MALDI-MSI基質，在負離子檢測模式下，利用MALDI-MSI分析法，建立了牛蒡根中化學成分的高覆蓋、可視化的質譜成像方法，實現了牛蒡根中糖類、有機酸類和黃酮類化合物的可視化表征，為牛蒡成分的開發及綜合利用提供了新的技術支持。