[發(fā)明專利]一種提高腫瘤細胞放療敏感性的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210709823.6
• 申請日: 2022-06-22
• 公開（公告）號: CN115887470A
• 公開（公告）日: 2023-04-04
• 發(fā)明（設計）人: 趙國平;韓靖;陳斌;王鵬;許安;吳李君
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: A61K31/675
• 分類號: A61K31/675;A61K31/713;A61K48/00;C12N15/87;C12N15/113;A61P35/00
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

本發(fā)明涉及一種提高腫瘤細胞放療敏感性的方法，具體公開了一種通過抑制抗凋亡蛋白Bcl?xL觸發(fā)鐵死亡信號而提高腫瘤細胞放療敏感性的技術方法。本發(fā)明主要解決由于凋亡信號缺失或紊亂造成的放療抵抗問題。本發(fā)明通過促進腫瘤細胞鐵死亡實現(xiàn)，具體包括通過基因敲除或小干擾RNA技術抑制細胞中Bcl?xL的蛋白表達水平。本方法通過抑制凋亡信號通路中的關鍵蛋白Bcl?xL實現(xiàn)了對腫瘤細胞鐵死亡信號的調控。

技術領域

本發(fā)明涉及一種提高腫瘤細胞放療敏感性的方法，特別涉及一種基于鐵死亡途徑的提高腫瘤細胞放療敏感性的方法。

背景技術

長期以來，人們普遍認為凋亡是治療惡性腫瘤的關鍵靶點。在臨床應用研究中，也是基于caspase依賴的凋亡途徑去尋找抗腫瘤的新方法。作為凋亡的核心調控因子，Bcl-2家族中抗凋亡蛋白(Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1等)和促凋亡蛋白(Bak、Bax、Bok、Puma等)之間的相互作用決定了細胞最終是否走向凋亡，因此Bcl-2家族分子常被作為腫瘤治療的靶標，靶向Bcl-2設計合成的抗腫瘤藥物Venetoclax已被美國藥物管理局批準使用。但是腫瘤細胞異常的凋亡途徑使得藥物的臨床使用效果并不理想。眾多研究證實鐵死亡作為一種新的程序性細胞死亡形式，其不同于凋亡的調控機制能夠克服腫瘤細胞的耐藥性，因此被認為是腫瘤治療的新靶點。

鐵死亡是2012年被定義的一種新型程序性細胞死亡方式，由細胞中谷胱甘肽過氧化物酶4失活、脂質過氧化物累積而誘發(fā)。作為一種可調控的細胞死亡方式，鐵死亡與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關，不斷有研究發(fā)現(xiàn)鐵死亡能夠調控腫瘤細胞的放/化療敏感性和耐藥性。例如，誘發(fā)鐵死亡能夠增加肺癌細胞對順鉑的敏感性，并且能克服卵巢癌細胞對多西他賽的耐藥性；此外，體內外實驗均證實鐵死亡能夠增加腫瘤細胞及異種移植瘤的輻射敏感性。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種提高腫瘤細胞放療敏感性的方法。

為實現(xiàn)上述目的及其他相關目的，本發(fā)明提供的技術方案是：一種提高腫瘤細胞放療敏感性的方法，通過促進腫瘤細胞鐵死亡實現(xiàn)，具體包括通過基因敲除、基因敲低或小干擾RNA技術抑制細胞中Bcl-xL的蛋白表達水平。

優(yōu)選的技術方案為：抑制細胞中Bcl-xL的蛋白表達水平包括使用Bcl-xL抑制劑實現(xiàn)。

優(yōu)選的技術方案為：所述Bcl-xL抑制劑為APG-1252。

優(yōu)選的技術方案為：小干擾RNA序列包括：NC：正向序列：5’-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3’；

反向序列：5’-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3’；

si-Bcl-xL-1：正向序列：5’-GGAACUCUAUGGGAACAAUTT-3’；

反向序列：5’-AUUGUUCCCAUAGAGUUCCAC-3’；

si-Bcl-xL-2：正向序列：5’-CAGGGACAGCAUAUCAGAGTT-3’；

反向序列：5’-CUCUGAUAUGCUGUCCCUGTT-3’。

由于上述技術方案運用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有的優(yōu)點是：

本發(fā)明的Bcl-xL促進了ACSL4、LPCAT3和PEBP1的表達，增加了細胞中脂質過氧化物的積累；與此同時，Bcl-xL蛋白的缺失增加了GPX4與Hsp90和LAMP2A的相互作用，從而促進GPX4的溶酶體降解過程，使細胞中脂質過氧化物無法及時清除，最終誘發(fā)鐵死亡。

附圖說明

附圖1為各缺陷型細胞系中相應蛋白表達情況。

附圖2為Bcl-2家族蛋白對erastin誘導的鐵死亡的響應情況(erastin(2μM)處理24h后，各組細胞存活情況的明場圖)。