[發(fā)明專利]乙型腦炎病毒抗體1D11及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210708971.6
• 申請日: 2022-06-22
• 公開（公告）號: CN114773461B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 安靜;盛子洋;高娜;范東瀛;王培剛;甄自達(dá);艾軍紅;劉利波
• 申請（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;G01N33/569;G01N33/577;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 商秀玲

本發(fā)明涉及抗體技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及乙型腦炎病毒抗體1D11及其應(yīng)用。本發(fā)明提供一種乙型腦炎病毒抗體，其重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)CDR1、CDR2、CDR3分別具有如SEQ ID NO.1?3所示的氨基酸序列，輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)CDR1、CDR2、CDR3分別具有如SEQ ID NO.4?6所示的氨基酸序列。該抗體能夠與乙型腦炎病毒結(jié)合，具有高度特異性和高結(jié)合能力，可用于乙型腦炎病毒的免疫熒光染色和流式細(xì)胞染色等檢測。同時，該抗體對乙型腦炎病毒具有高效的中和能力。該抗體為乙型腦炎病毒的防治、檢測和診斷提供了有效的工具。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種乙型腦炎病毒抗體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）又稱乙型腦炎病毒，屬于黃病毒科黃病毒屬。JEV經(jīng)庫蚊叮咬傳播，引起日本腦炎（Japanese encephalitis, JE），即流行性乙型腦炎（簡稱乙腦）。

目前，JEV是亞洲病毒性腦炎最重要的病原體，乙腦仍然是一個不容忽視的公共衛(wèi)生問題。盡管目前已經(jīng)有成熟的疫苗用于預(yù)防，但是仍有散發(fā)乙腦疫情不斷出現(xiàn)，因此，仍需要開發(fā)具有高特異性、結(jié)合能力和中和能力的JEV抗體，以滿足診斷、預(yù)防和治療的需要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供一種JEV抗體。本發(fā)明的另一目的是提供該抗體的應(yīng)用及其相關(guān)產(chǎn)品。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明以人乙腦減毒活疫苗為免疫原免疫小鼠，通過雜交瘤技術(shù)篩選到一株JEV特異性的雜交瘤（克隆號記為1D11），制備小鼠腹水并純化抗體，得到能夠特異性結(jié)合JEV的鼠源性單克隆抗體（mAb）1D11，該抗體對JEV具有較高的親和力，同時具有中和JEV的能力。

具體地，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供JEV抗體或其抗原結(jié)合片段，其重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)CDR1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)CDR1具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，CDR2具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，CDR3具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。

優(yōu)選地，所述JEV抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈可變區(qū)具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。輕鏈可變區(qū)具有如SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述JEV抗體為鼠源單克隆抗體，其重鏈恒定區(qū)具有如SEQ IDNO.11所示的氨基酸序列，其輕鏈恒定區(qū)具有如SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列。

本發(fā)明中，所述抗原結(jié)合片段可選自Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、dAb、互補(bǔ)決定區(qū)片段、單鏈抗體、人源化抗體、嵌合抗體、雙特異抗體或多特異抗體。

本發(fā)明提供含有所述JEV抗體或其抗原結(jié)合片段的雙特異抗體或多特異抗體。

基于上述抗體，本發(fā)明提供一種核酸分子，其編碼所述JEV抗體或其抗原結(jié)合片段。

根據(jù)上述提供的JEV抗體或其抗原結(jié)合片段的氨基酸序列，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定編碼所述JEV抗體或其抗原結(jié)合片段的核酸分子的核苷酸序列，并根據(jù)宿主細(xì)胞的密碼子偏好性選擇不同的核酸分子的核苷酸序列。

作為本發(fā)明的一種實施方式，編碼所述重鏈可變區(qū)的核酸分子具有如SEQ IDNO.9所示的核苷酸序列，編碼所述輕鏈可變區(qū)的核酸分子具有如SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列。

編碼所述重鏈恒定區(qū)的核酸分子具有如SEQ ID NO.13所示的核苷酸序列，編碼所述輕鏈恒定區(qū)的核酸分子具有如SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列。