[發明專利]茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法

在審

• 申請號: 202210701322.3
• 申請日: 2022-06-20
• 公開（公告）號: CN115074414A
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 巨婷;黃玲珠;趙彥遠;張遠志
• 申請（專利權）人: 廣州金至檢測技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365
• 代理人: 萬志香

本發明公開了一種茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法，其是將粉碎后的茯磚茶粉末，加入85℃以上生理鹽水中，浸泡10min～30min，再拍打1min～2min后，傾注于改良孟加拉紅培養基上，培養3天～4天，計數。本發明的茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法，可以充分地使冠突散囊菌閉囊殼破裂、更好地使冠突散囊菌釋放，能夠真實反映茯磚茶中冠突散囊菌的數量，大大提高檢測結果的準確度和穩定性，能夠更加準確地評價茯磚茶的質量好壞。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，更具體地，本發明涉及一種茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法。

背景技術

一直以來，茯磚茶是作為邊疆少數民族日常生活中不可或缺的必備品，在邊疆享有“寧可三日無糧，不可一日無茶”的美譽，且研究發現，盡管邊疆人民常年食用牛羊肉及多種高脂高蛋白的食物，但其肥胖病、高血脂、高血糖等“富貴病”的發病率并不高，針對此現象經多方研究發現與茯磚茶內部或表面的金黃色顆粒有關，其是一種對人體非常有益的益生菌體，專家命名為“冠突散囊菌”，它產生的一種酶具有較強的降血脂、調節腸道菌群、提高免疫力、減肥等功效，這一研究發現，使得人們對茯磚茶有了極大關注和重視。更因此，茯磚茶成為人們養生的一種特別推薦方式，以及利用冠突散囊菌開發保健食品具有重要意義。

茯磚茶因具有獨特的冠突散囊菌而聞名，而冠突散囊菌數量的多少是衡量茯磚茶質量好壞的重要依據。目前針對冠突散囊菌的計數方法參照GB4789.15-2016第一法《食品安全國家標準.食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數》。然而，該方法從內容上針對的是食品中霉菌和酵母菌的計數，在檢測過程中未明確規定冠突散囊菌在孟加拉紅培養基上的菌落形態，故有可能計數與冠突散囊菌形態相似的霉菌，不但無法真實反映冠突散囊菌的數量，而且誤把毒霉菌當冠突散囊菌可能引起重大安全事故；此外，《食品安全國家標準.食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數》方法中，樣品采用的是普通前處理方式(五點法取樣，稀釋液溫度一般在室溫進行，未規定浸泡時間)，一是很難使冠突散囊菌閉囊殼破裂，因此在馬鈴薯葡萄糖培養基上或孟加拉紅培養基上形成的菌落可能是2～3個或更多個孢子生長發育而成；二是冠突散囊菌很難釋放；三是一些生長較快的霉菌(如圖1所示)會抑制冠突散囊菌，因此采用國標方法并不能準確地反映茯磚茶中冠突散囊菌的數量。

近年來，科研工作者對茯磚茶中冠突散囊菌的檢測過程進行了一些改進，發現在樣品處理過程中，粉碎取樣可打破冠突散囊菌閉囊殼結構，顯著提高檢出率。更進一步發現，冠突散囊菌檢測的關鍵步驟處理為：無菌條件下萬能粉碎機全部粉碎后取樣，取樣量不小于10g，用生理鹽水進行稀釋后，使用拍擊式均質機拍打1min，涂布式進行正置培養。然而，該改進的前處理方式，冠突散囊菌還是無法完全釋放，且仍然有可能會計數一些和冠突散囊菌相似的霉菌或因霉菌的大量繁殖抑制了冠突散囊菌，還是不能精準反映茯磚茶中冠突散囊菌的數量。

因此，探求冠突散囊菌更精準的計數方法非常有意義。

發明內容

基于此，本發明的目的之一在于提供一種茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法，該計數方法可以更精準地反映茯磚茶中冠突散囊菌的數量，從而可以更加準確地評價茯磚茶的質量好壞。

實現上述發明目的的具體技術方案包括如下：

一種茯磚茶中冠突散囊菌的計數方法，所述計數方法包括以下步驟：

(1)、將粉碎后的茯磚茶粉末，加至85℃以上的生理鹽水中，浸泡10min～30min，得到待測溶液；

(2)、拍打步驟(1)所述待測溶液1min～2min后，將待測溶液傾注于改良孟加拉紅培養基上，26℃～30℃培養3天～4天，計數；所述改良孟加拉紅培養基包括硫酸銨、蔗糖和KCl。

在其中一些實施例中，步驟(1)中，所述生理鹽水的溫度為90℃～100℃。

在其中一些實施例中，所述生理鹽水的溫度為95℃～100℃。