[發明專利]一種利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法

在審

• 申請號: 202210700419.2
• 申請日: 2022-06-21
• 公開（公告）號: CN115029248A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 余旭亞;師中迪;顧聃
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12P7/6463;C12R1/89
• 代理公司: 北京眾澤信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11701
• 代理人: 張艷萍

1.一種利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法包括：

采用兩階段培養模式，在第一階段進行藻種兼養的培養使藻細胞在短期內快速生長，隨后收集微藻培養后的廢水，簡單過濾后配比BG-11形成混合培養基，結合光生物反應器，利用混合培養基培養微藻。

2.如權利要求1所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法還包括：

以葡萄糖為碳源兼養培養纖維藻，待微藻生長至對數生長期后期，待藻細胞沉降后倒出上清液，收集剩余的藻細胞作為種子液，上清液經抽濾后得到養藻廢水；將養藻廢水配比BG-11作為混合培養基，用不同配比的混合培養基重懸微藻于柱式光生物反應器，連續通入10％的CO₂和空氣混合氣體，并置于一定的溫度和照強度的環境下培養，檢測、分析微藻生物量、脂質含量和產率。

3.如權利要求1所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法包括以下步驟：

步驟一，進行回用廢水的收集；

步驟二，利用回用廢水配比BG-11培養微藻；

步驟三，利用有機溶劑提取步驟二得到的培養液中藻細胞內的脂質。

4.如權利要求3所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述步驟一中的回用廢水的收集包括：

以葡萄糖為碳源的BG-11培養基在500mL三角瓶中兼養培養纖維藻，待微藻生長至對數生長期后期，沉降兩日后，在超凈臺中倒掉上清液，混合剩余的藻細胞作為種子液，收集的上清液經抽濾后得到回用廢水。

5.如權利要求4所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述微藻為纖維藻Ankistrodesmus sp.EHY。

6.如權利要求3所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述步驟二中的利用回用廢水配比BG-11培養微藻包括：

將回用廢水配比新鮮的BG-11作為混合培養基，重懸浮第一階段的種子液至1L的柱式光生物反應器中，確保微藻接種量為0.9g/L，連續通入10％的CO₂和空氣混合氣體，并置于一定溫度和照強度的環境下培養，得到最終的培養液。

7.如權利要求6所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述混合培養基中回用廢水濃度為30～60％。

8.如權利要求6所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述溫度為25℃，光照強度為7000～8000lux。

9.如權利要求3所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述步驟三中的利用有機溶劑提取步驟二得到的培養液中藻細胞內的脂質包括：

將由步驟二得到的最終的培養液經5000r/min離心5min，收集藻細胞于離心管中，-80℃冷凍過夜，利用凍干機凍干24h后稱重；稱取0.2g干藻粉，加入石英砂并研磨混勻，再加入有機溶劑重復抽提至藻體發白，離心收集有機相得總脂質，利用重量法測得微藻藻粉的脂質含量。

10.如權利要求9所述利用回用廢水提高微藻脂質產量的方法，其特征在于，所述有機溶劑為氯仿-甲醇溶液，其中氯仿-甲醇溶液中氯仿與甲醇的體積比為2：1；所述石英砂的質量為干藻粉質量的2倍。