[發明專利]高體鰤性別差異指示標簽microRNA及試劑盒與應用

有效

• 申請號: 202210696707.5
• 申請日: 2022-06-20
• 公開（公告）號: CN114934121B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 趙娜;張博;朱春華;鄧秋霞;王秋梅;朱旭楓;黃洋;茹笑影;胡琴
• 申請（專利權）人: 南方海洋科學與工程廣東省實驗室（湛江）
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/113;C12N15/11
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 羅新

本發明公開了高體鰤性別差異指示標簽microRNA及試劑盒與應用，所述高體鰤性別差異指示標簽microRNA的核酸序列如Seq?ID?No.1所示。所述microRNA的核酸序列是根據高體鰤血清外泌體中small?RNA設計的，擴展了血清外泌體的應用，取高體鰤的血清不會對高體鰤魚體造成不可恢復的創傷，可以減少高體鰤的損失。所述用于高體鰤性別檢測的microRNA，鑒定準確度高，具有生產價值和市場價值。

技術領域

本發明涉及魚類生物相關技術領域，尤其是涉及高體鰤性別差異指示標簽microRNA及試劑盒與應用。

背景技術

高體鰤(Seriola?dumerili)是一種肉質好，生長速度快，營養價值高的世界性深遠海經濟魚類。高體鰤是雌雄異體魚類，但表型沒有顯著的性別二態性，因此難以從魚體表面直接判斷魚的性別。此外，在人工養殖條件下，高體鰤表現出嚴重的生殖功能障礙，由于高體鰤性別鑒定困難，極大影響了高體鰤的催產繁育工作，嚴重制約了高體鰤的工廠化養殖。

外泌體(exosomes)是一種直徑在30-150nm之間，具有脂質雙分子層結構的細胞外囊泡(extracellular?vesicles,EVs)，其廣泛分布于動物體液內。外泌體內含有多種大小為18-26個核苷酸、高度保守的microRNAs，其可作為重要的調節分子參與細胞間的通訊，成為診斷和生理過程監測的潛在生物標志物，在生物分子標記應用中發揮重要作用。在海水魚類中外泌體來源的microRNAs作為生物標志物的研究相對較少，目前沒有通過高體鰤外泌體中microRNAs來鑒定高體鰤性別的報道。

因此，開發一種通過高體鰤外泌體中microRNAs來鑒定高體鰤性別，具有理論意義、生產價值和市場價值。

發明內容

本發明所要解決的第一個技術問題是：

提供一種高體鰤性別差異指示標簽microRNA。

本發明所要解決的第二個技術問題是：

提供一種高體鰤性別差異指示標簽microRNA相關的生物材料。

本發明所要解決的第三個技術問題是：

提供用于擴增所述的高體鰤性別差異指示標簽microRNA的引物組。

本發明所要解決的第四個技術問題是：

提供一種試劑盒。

本發明所要解決的第五個技術問題是：

提供一種檢測高體鰤性別的方法。

本發明還提出所述的高體鰤性別差異指示標簽microRNA、所述的生物材料、所述的引物組，所述的試劑盒在制備高體鰤性別檢測試劑中的應用。

本發明還提出所述的miRNA、所述的生物材料、所述的引物組，或所述的試劑盒在高體鰤養殖中的應用。

本發明還提出所述高體鰤性別檢測的microRNA的篩選方法在海魚性別鑒定方面的應用。

為了解決所述第一個技術問題，本發明采用的技術方案為：

一種高體鰤性別差異指示標簽microRNA，所述高體鰤性別差異指示標簽microRNA的核酸序列如Seq?ID?No.1所示，所述microRNA性別差異指示標簽為abu-miR-30b。具體的，所述microRNA的核酸序列為TGTAAACATCCTACACTCTCAGC。

根據本發明的一種實施方式，所述microRNA的核酸序列是根據高體鰤血清外泌體中small?RNA設計的。

根據本發明的實施方式，所述技術方案中的一個技術方案至少具有如下優點或有益效果之一：