[發明專利]一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外評測方法

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• 申請號: 202210686435.0
• 申請日: 2022-06-16
• 公開（公告）號: CN115060674A
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發明（設計）人: 丁瑞;郭春寶;耿菲菲;楊金鳳;趙春花;金芝
• 申請（專利權）人: 云南西草資源開發有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 昆明合盛知識產權代理事務所(普通合伙) 53210
• 代理人: 王丹丹

1.一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、取含苦參堿的面霜、地塞米松軟膏或酮康唑軟膏，使用滅菌后的純化水按照不同稀釋倍數分別稀釋2份備用；另取同等體積的2份純化水，備用；

S2、分別取含苦參堿的面霜稀釋液、純化水、地塞米松或酮康唑的稀釋液兩份，一份加入透明質酸酶溶液，另一份加入同等體積的醋酸緩沖液，保溫放置；

S3、在S2中加入透明質酸酶溶液的混合液中加入透明質酸鈉溶液、在另一份加入同等體積醋酸緩沖液，保溫一段時間后取出冷卻至室溫；

S4、根據ELISA透明質酸酶試劑盒使用方法，往試劑盒中添加S3中的待測物質，測定吸光度(OD值)，通過OD值計算透明質酸酶的抑制率；

S5、以面霜稀釋液透明質酸酶抑制率與地塞米松或酮康唑稀釋液的透明質酸酶抑制率進行對比，若面霜稀釋液透明質酸酶抑制率達到地塞米松或酮康唑稀釋液的透明質酸酶抑制率的50％以上(含50％)，即判定該面霜具有舒緩功效，若低于50％，則沒有舒緩功效。

2.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述S1中稀釋倍數為2～8倍。

3.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述S2中透明質酸酶溶液用醋酸緩沖液作為溶液配制，現配現用，且保溫時間為10～30分鐘，溫度為20℃～40℃。

4.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述S3中保溫時間為10～30分鐘，溫度為20℃～40℃。

5.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述S4中以待測物質的濃度為縱坐標，OD450值為橫坐標，制作標準曲線，根據待測物質的OD450值，計算透明質酸酶的抑制率。

6.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述S5計算公式為(面霜稀釋液透明質酸酶的抑制率/地塞米松或酮康唑稀釋液透明質酸酶的抑制率)*100％。

7.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述面霜稀釋液透明質酸酶的抑制率計算方式為：[(加入透明質酸酶的面霜稀釋液的OD值-未加透明質酸酶的面霜稀釋液OD值)-(加入透明質酸酶的純化水的OD值-未加透明質酸酶的純化水的OD值)]/(加入透明質酸酶的面霜稀釋液的OD值-未加透明質酸酶的面霜稀釋液OD值)。

8.根據權利要求1一種用于含苦參堿面霜舒緩功效的體外測評方法，其特征在于，所述地塞米松或酮康唑稀釋液透明質酸酶抑制率的計算方式為：[(加入透明質酸酶的地塞米松或酮康唑稀釋液的OD值-未加透明質酸酶的地塞米松或酮康唑稀釋液的OD值)-(加入透明質酸酶的純化水的OD值-未加透明質酸酶的純化水的OD值)]/(加入透明質酸酶的地塞米松或酮康唑稀釋液的OD值-未加透明質酸酶的地塞米松或酮康唑稀釋液的OD值)。