[發明專利]一種廣藿香醇合酶突變體及其編碼基因以及應用

在審

• 申請號: 202210683574.8
• 申請日: 2022-06-17
• 公開（公告）號: CN115074349A
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 劉敏;陶欣藝;郭姣姣;魏東芝;馬昱澍
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N15/81;C12N1/21;C12N1/19;C12P7/02;C12P5/00;C12R1/19;C12R1/865
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 余永莉

1.一種廣藿香醇合酶突變體，其特征在于，所述廣藿香醇合酶突變體包括以SEQ IDNO.2所示野生型的廣藿香醇合酶為模板，

第136位賴氨酸突變為丙氨酸形成的突變體K136A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

第136位賴氨酸突變為蘇氨酸形成的突變體K136T，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

第136位賴氨酸突變為絲氨酸形成的突變體K136S，其氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；

第136位賴氨酸突變為纈氨酸形成的突變體K136V，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；

第297位亮氨酸突變為纈氨酸形成的突變體L297V，其氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

第297位亮氨酸突變為丙氨酸形成的突變體L297A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；

第405位半胱氨酸突變為丙氨酸形成的突變體C405A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；

第405位半胱氨酸突變為蘇氨酸形成的突變體C405T，其氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示；

第405位半胱氨酸突變為絲氨酸形成的突變體C405S，其氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示；

第464位精氨酸突變為異亮氨酸形成的突變體R464I，其氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示；

第525位酪氨酸突變為苯丙氨酸形成的突變體Y525F，其氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示；

第531位酪氨酸突變為苯丙氨酸形成的突變體Y531F，其氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示。

2.一種廣藿香醇合酶突變體的編碼基因，其特征在于，所述編碼基因編碼如權利要求1所述的任意一種廣藿香醇合酶突變體的氨基酸序列。

3.一種包含如權利要求2所述的廣藿香醇合酶突變體的編碼基因的重組基因工程菌。

4.根據權利要求3所述的重組基因工程菌，其特征在于，所述重組基因工程菌以大腸桿菌或釀酒酵母為宿主菌。

5.一種如權利要求1所述的廣藿香醇合酶突變體在制備廣藿香醇中的應用。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的應用包括以權利要求1所述的廣藿香醇合酶突變體為催化劑進行反應，催化法尼基焦磷酸環化在細胞內進行，獲得包含廣藿香醇的產物。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述應用包括：將如權利要求2所述的廣藿香醇合酶突變體的編碼基因轉化入宿主細胞，培養該細胞，從而獲得包含廣藿香醇的產物。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于，所述產物包括：廣藿香醇、α-布藜烯、α-愈創木烯。