[發(fā)明專利]一種具有改善水禽免疫力與腸道的無抗飼料添加劑及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210681307.7 | 申請日： | 2022-06-15 |
| 公開（公告）號： | CN115024428A | 公開（公告）日： | 2022-09-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉建高;李忠良;焦莉;鐘玉鳴 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州希望飼料有限公司 |
| 主分類號： | A23K50/75 | 分類號： | A23K50/75;A23K50/70;A23K10/30;A23K10/37;C12N1/12;C12N1/20;C12R1/89;C12R1/01 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001 | 代理人： | 方燕;劉明星 |
| 地址： | 510000 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 具有 改善 水禽 免疫力 腸道 飼料添加劑 及其 制備 方法 | ||
1.一種具有改善水禽免疫力與腸道的無抗飼料添加劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
S1、微藻的預(yù)培養(yǎng)：將微藻藻種經(jīng)無菌操作接種于滅過菌的A0培養(yǎng)基中，使用光照培養(yǎng)，當(dāng)藻液的光密度值OD達(dá)到600-700后，離心將微藻均分成三份進(jìn)行培養(yǎng)；
S2、藻蛋白強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上時，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A1培養(yǎng)基，再培養(yǎng)2-4天后，收獲微藻A；
S3、藻脂類強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上時，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A2培養(yǎng)基，采用無光-有光交替培養(yǎng)，培養(yǎng)5-7天后，收獲微藻B；
S4、藻發(fā)酵強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A3培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，測定生物量增加至200-350mg/L，再培養(yǎng)24-48h，得到微藻C；
S5、飼料添加劑配制：將步驟S2、S3和S4得到的微藻A、微藻B和微藻C分別進(jìn)行干燥，混合，得到無抗飼料添加劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，具體包括如下步驟：
S1、微藻的預(yù)培養(yǎng)：將微藻藻種經(jīng)無菌操作接種于滅過菌的A0培養(yǎng)基中，然后使用光照培養(yǎng)，當(dāng)藻液的光密度值OD達(dá)到600-700后，離心將微藻均分成三份進(jìn)行培養(yǎng)；
A0培養(yǎng)基成分為：NH4Cl 600mg/L，KH2PO470 mg/L，K2HPO4 88mg/L，MgSO47H2O 80mg/L，CaCl2 50mg/L，水1000mL，pH 7-8；
S2、藻蛋白強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，每天震蕩3-4次，培養(yǎng)溫度為20℃-30℃，光照強(qiáng)度為4500-6000Lux，培養(yǎng)4-6天，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上時，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A1培養(yǎng)基，再培養(yǎng)2-4天后，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上，收獲微藻A；
A1培養(yǎng)基成分為：改性的鐵皮石斛粉末50-100mg/L，NH4Cl 700mg/L，KH2PO4 60mg/L，K2HPO4 100mg/L，MgSO47H2O 80mg/L，CaCl2 50mg/L，水1000mL，pH 7-8；
S3、藻脂類強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，每天震蕩3-4次，培養(yǎng)溫度為20-30℃，光照強(qiáng)度為4500-6000Lux，培養(yǎng)2-4天，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上時，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A2培養(yǎng)基，采用無光-有光交替培養(yǎng)，有光培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度20℃-30℃，光照強(qiáng)度6000-7000Lux，培養(yǎng)18-30h，震蕩培養(yǎng)；無光培養(yǎng)條件為：150rpm震蕩培養(yǎng)，每隔18-30h更換一次光線的開關(guān)，并在暗培養(yǎng)時加入脈沖超聲波培養(yǎng)，在超聲下培養(yǎng)10-20min，每天1-2次，培養(yǎng)5-7天后，收獲微藻B；A2培養(yǎng)基成分為：板栗殼-改性高嶺土100-200mg/L，NaNO3 100-200mg/L，KH2PO4 60mg/L，K2HPO4 100mg/L，MgSO47H2O 80mg/L，CaCl2 50mg/L，水1000mL，pH 7-8；
S4、藻發(fā)酵強(qiáng)化培養(yǎng)：將步驟S1得到的一份微藻加入A0培養(yǎng)基，然后使用光照培養(yǎng)，每天震蕩3-4次，培養(yǎng)溫度為20℃-30℃，光照強(qiáng)度為4500-6000Lux，培養(yǎng)2-4天，測定氨氮去除率、總氮去除率分別為90％以上和70％以上，離心后，將藻體轉(zhuǎn)入A3培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：避光，150rpm震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)24-48h后，測定生物量增加至200-350mg/L，再培養(yǎng)24-48h，得到微藻C；
A3培養(yǎng)基成分為：葡萄糖100-200mg/L，海藻酸鈉100-150mg/L，NH4Cl 100-200mg/L，KH2PO4 60mg/L，K2HPO4100 mg/L，MgSO47H2O 80mg/L，CaCl2 50mg/L，水1000mL，pH 7-8；
S5、飼料添加劑配制：將步驟S2、S3和S4得到的微藻A、微藻B和微藻C分別進(jìn)行干燥，離心后，55℃-60℃烘干，按照微藻A、微藻B和微藻C的質(zhì)量比為50-60：25-35：20-30進(jìn)行混合，得到無抗飼料添加劑。
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