[發明專利]一種多肽及在促進人自然殺傷細胞增殖并制備人自然殺傷細胞培養基中的應用

在審

• 申請號: 202210658768.2
• 申請日: 2022-06-13
• 公開（公告）號: CN114835779A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 陳飛
• 申請（專利權）人: 陳飛
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12N5/0783
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種多肽及在促進人自然殺傷細胞增殖并制備人自然殺傷細胞培養基中的應用。自然殺傷細胞是抗腫瘤及病毒的固有免疫細胞，在天然免疫中扮演著重要的角色，在早期抗腫瘤和免疫監視方面也具有重要的作用，并且無需抗原特異性識別就可以直接殺傷腫瘤細胞。由于自然殺傷細胞在人體的數量較少，限制了大規模的研究實驗。本發明多肽具有促進人自然殺傷細胞增殖的作用，可用于開發制備促進人自然殺傷細胞體外增殖的培養基。

技術領域

本發明屬于生物化學領域，涉及多肽及自然殺傷細胞培養，具體涉及一種多肽及在促進人自然殺傷細胞增殖并制備人自然殺傷細胞培養基中的應用。

背景技術

20世紀70年代初期，研究者在淋巴細胞中發現了自發性的細胞毒作用，找到了新的淋巴細胞亞群，將其命名為自然殺傷細胞(Natural killer cells，NK)。自然殺傷細胞是抗腫瘤及病毒的固有免疫細胞，在天然免疫中扮演著重要的角色，在早期抗腫瘤和免疫監視方面也具有重要的作用，并且無需抗原特異性識別就可以直接殺傷腫瘤細胞。由于自然殺傷細胞在人體的數量較少，限制了大規模的研究實驗。研究其細胞生物學特征，并在體外擴增獲得大量高純度的NK細胞成為了熱點問題。

多肽是氨基酸連結成的化合物，由肽鍵相連，通常指的是由三個或三個以上氨基酸組成的化合物。多肽可包括活性多肽和人工合成多肽，活性多肽作為蛋白質水解產物，具有一定生理作用。人工合成多肽可以根據需要自由控制氨基酸連接順序，為構建多肽庫提供了可能，成為活性篩選的重要來源。

基于促進人自然殺傷細胞增殖的多肽的發現，特提出本發明創造。

發明內容

本發明目的是克服現有技術的不足，提供一種多肽及在促進人自然殺傷細胞增殖并制備人自然殺傷細胞培養基中的應用。

本發明目的通過下述技術方案得以實現：

一種多肽，氨基酸序列為RNDWTMDEQ。

上述多肽在促進人自然殺傷細胞體外增殖中的應用。

上述多肽在制備促進人自然殺傷細胞體外增殖的培養基中的應用。

有益效果：

本發明提供的多肽具有促進人自然殺傷細胞增殖的作用，可用于開發制備促進人自然殺傷細胞體外增殖的培養基。

附圖說明

圖1為多肽的液相檢測圖；保留時間8.273min，HPLC純度95.327％。

圖2為NK細胞分離培養的流式鑒定圖，代表NK細胞的CD3-CD56+表型比例顯著升高。

圖3為westernblot檢測結果，多肽J組NK細胞中殺傷力相關蛋白表達明顯升高。

具體實施方式

以下實施例僅用于具體介紹本發明的實質內容，但不以此限定本發明的保護范圍。

一、實驗材料

序列為RNDWTMDEQ(Sequence NO.1)的多肽J由南京肽谷生物科技有限公司采用常規固相合成法合成。多肽J的分子式為C₄₈H₇₁N₁₅O₁₉S，分子量為1194.23，質譜檢測到分子離子峰[M+H]⁺1195.2。HPLC純度95.327％，見圖1。

NK細胞培養基，賽德特生物制藥有限公司(主要組成成分為RPMI 1640、IL-15、IL-2、SCF，僅用于人淋巴細胞中分離的NK細胞的體外擴增培養，不具備對細胞的選擇、誘導、分化功能)；RPMI 1640培養基和胎牛血清，GIBCO公司。

MTT試劑和單抗以及Westernblot一抗、二抗，碧云天。

二、實驗方法