[發明專利]一種等離子體改性細胞培養板的方法

在審

• 申請號: 202210656361.6
• 申請日: 2022-06-10
• 公開（公告）號: CN114836323A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 張勝有;葉竹青
• 申請（專利權）人: 蘇州賽普生物科技有限公司
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00
• 代理公司: 北京易捷勝知識產權代理事務所(普通合伙) 11613
• 代理人: 李會娟

本發明涉及一種等離子體改性細胞培養板的方法，包括如下步驟：S1：將細胞培養板放置在等離子表面處理設備中，抽真空，然后通入第一含氟化合物氣體，第一含氟化合物氣體電離出正負電荷，對細胞培養板進行初步表面疏水改性處理。S2：結束第一含氟化合物氣體，向等離子表面處理設備中通入第二含氟化合物氣體，第二含氟化合物氣體電離出正負電荷，對細胞培養板進行深度表面疏水改性處理。本發明改性方法處理時間短，操作簡單，處理效率高，成本較低，能夠大規模使用以及生產，能夠大大降低細胞培養板的表面能，實現了細胞的低粘附，使得細胞貼壁進一步減少。另外，含氟化合物的含氟基團引入細胞培養板表面之后也不會危害細胞的生長，安全性較高。

技術領域

本發明屬于細胞培養技術領域，具體涉及一種等離子體改性細胞培養板的方法。

背景技術

通過物理或化學方法改善物質表面的性能的方法稱為表面改性。常用的表面改性的主要方法包括物理改性和化學改性兩類方法。物理改性包括表面涂覆改性、表面真空鍍、濺射、表面機械改性和噴射等。化學改性包括放電、射線輻照、離子鍍、電鍍、火焰改性、溶液處理等。

貼壁培養的細胞對培養板孔的表面的親水性要求較高，因此一般需要對細胞培養板進行親水處理。而懸浮培養的細胞則要求細胞盡可能少的貼壁，細胞培養板的表面則要求具有較低的表面能，使細胞無法附著，即需要超低吸附細胞培養板。未進行任何處理的細胞培養板雖然能夠使大部分細胞處于懸浮狀態，但約2％以上的細胞仍然存在貼壁現象。這種較少的貼壁現象對于一些特定的應用仍然會產生不利影響，例如干細胞培養過程中，如果有極少細胞貼壁，仍然會導致附著介導的分化發生。

現有技術中，一般采用抗細胞粘附液對細胞培養板進行處理，具體地，制備抗細胞粘附液，然后將其加入細胞培養板，進行蒸發干燥，從而使細胞培養板孔的表面涂覆一層抗細胞粘附物質，使細胞無法附著。然而，這種方法的流程復雜繁瑣，處理時間較長，限制了大規模生產，生產效率較低，且抗細胞粘附液成本較高，進一步限制了其大規模應用。

因此，需要提供一種成本更低、處理更加簡單、能夠大規模應用的細胞培養皿的改性處理方法。

發明內容

(一)要解決的技術問題

為了解決現有技術中存在的抗細胞粘附液對細胞培養板進行處理的操作繁瑣、處理效率低、無法大規模應用的問題，本發明提供一種等離子體改性細胞培養板的方法。

(二)技術方案

為了達到上述目的，本發明采用的主要技術方案包括：

一種等離子體改性細胞培養板的方法，包括如下步驟：

S1：將未經處理的細胞培養板放置在等離子表面處理設備中，抽真空，然后通入第一含氟化合物氣體，第一含氟化合物氣體在等離子表面處理設備中電離出正負電荷，對細胞培養板進行初步表面疏水改性處理；

S2：步驟S1結束后，停止通入第一含氟化合物氣體，向等離子表面處理設備中通入第二含氟化合物氣體，第二含氟化合物氣體在等離子表面處理設備中電離出正負電荷，對細胞培養板進行深度表面疏水改性處理。

如上所述的等離子體改性細胞培養板的方法，優選地，還包括如下步驟：

S3：重復1次步驟S1-S2，繼續對細胞培養板進行表面疏水改性處理。

如上所述的等離子體改性細胞培養板的方法，優選地，所述第一含氟化合物氣體以及所述第二含氟化合物氣體為四氟化碳、二氟甲烷、三氟甲烷或者三氟氯甲烷中的一種。

如上所述的等離子體改性細胞培養板的方法，優選地，所述第一含氟化合物氣體與所述第二含氟化合物氣體為不同的含氟化合物。

如上所述的等離子體改性細胞培養板的方法，優選地，所述細胞培養板為聚苯乙烯、聚丙烯、聚酯、聚碳酸酯、聚乙烯或者高密度聚乙烯材質。