[發明專利]一種植物甾醇總量快速檢測的前處理方法

在審

• 申請號: 202210654018.8
• 申請日: 2022-06-10
• 公開（公告）號: CN114994210A
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 張協光;李意;嚴虞虞;林宇豪;蘇佳婷;李錦才;黃小龍
• 申請（專利權）人: 深圳市計量質量檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 謝曉華

本發明公開了一種快速檢測植物甾醇總量的前處理方法，包括以下步驟：S1：稱取待測樣品，加入內標溶液和水，在室溫下超聲波水浴處理；S2:向經過步驟S1處理的溶液加入皂化劑，在室溫下超聲波水浴處理后，進行加熱處理，完成皂化；S3：將經過步驟S2處理的溶液冷卻至室溫后，加入萃取液進行萃取，萃取完成后，進行離心，提取上層有機液層，向上層有機液層加入脫水劑進行脫水，用氮氣吹干；S4：向步驟S3所制得的濃縮液中加入硅烷化試劑，加熱處理后，冷卻至室溫，制得待測樣品。采用本發明的前處理方法，使得在進行氣相色譜分析的前處理中不需要制備氧化鋁柱和配制展開劑，有效地簡化了前處理的步驟，從而降低了檢測的成本和時間。

技術領域

本發明涉及化學分析技術領域，具體涉及一種植物甾醇總量快速檢測的前處理方法。

背景技術

植物甾醇是植物中的一種活性成分，與膽固醇具有同樣的環狀結構，區別在于其側鏈不同。研究表明，植物甾醇具有降低膽固醇，預防動脈粥樣硬化、抑制腫瘤細胞增殖等功能活性，被廣泛應用于食品、藥品領域。人體不能轉化合成植物甾醇，只能通過食物攝取。植物甾醇廣泛存在于植物的根、莖、葉和果實中，在植物油中含量較高，是人體攝取植物甾醇的重要途徑。

目前，我國在植物甾醇檢測方面尚未形成強制性標準文件，然而植物甾醇組分多，現有研究方法步驟繁瑣，檢測成本大，導致植物甾醇的質量控制不能大規模開展。目前檢測方法主要有薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法和氣相質譜法等。

薄層色譜法，檢測前的處理是利用不同物質在一定吸附劑與展開劑中吸附和解吸能力的差異，使各個被測組分以不同的速度移動，最后達到分離的一種方法，可用于甾醇的分離、純化和檢測。薄層色譜法應用在甾醇檢測領域一般有兩個目的，一是定性鑒別，通過良好的分離，根據斑點的比移值(retention factor，Rf)和顏色深淺，判斷某甾醇的存在與否，二是定量測定，對上述薄層板進行掃描，利用標準曲線可以準確測出樣品中甾醇的含量。薄層色譜法的樣品前處理比較繁瑣且重復性差。

液相色譜法對樣品進行前處理時，在經過皂化之后還需冷凍2h，從而導致前處理比較費時。

現有的氣相色譜法適合于分析揮發性強的物質，而對于發揮性弱、熱穩定性差的物質往往不能直接進樣分析，需將這類物質進行適當的化學處理轉化成相應的揮發性衍生物，這類物質才能夠得到較好的分離。植物甾醇分子中含有極性羥基，揮發性差，在高溫下容易失水或者分解，所以需要對樣品進行衍生化處理，才能得到很好的分離。目前一般的衍生化方法包括硅烷化、酯化和酰化。前處理分離甾醇時，一般使用HP-5等非極性柱進行過柱，現有的氣相質譜法在前處理階段同樣需要過柱，因此現有的氣相色譜法或者氣相質譜法的前處理方法均操作繁瑣。

由上述可知，現有的植物甾醇檢測方法的前處理，操作均較為繁瑣，費時費力，從而使得導致植物甾醇的檢測不能大規模開展。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種植物甾醇總量快速檢測的前處理方法，以解決現有植物甾醇檢測方法的前處理操作繁瑣，從而導致檢測成本高的技術問題。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種植物甾醇總量快速檢測的前處理方法，包括以下步驟：

S1：稱取待測樣品，加入內標溶液和水，在室溫下超聲波水浴處理；

S2:向經過所述步驟S1處理的溶液加入皂化劑，在室溫下超聲波水浴處理后，進行加熱處理，完成皂化；

S3：將經過所述步驟S2處理的溶液冷卻至室溫后，加入萃取液進行萃取，萃取完成后，進行離心，提取上層有機液層，向上層有機液層加入脫水劑進行脫水，用氮氣吹干，得到濃縮液；

S4：向所述步驟S3所制得的濃縮液中加入硅烷化試劑，加熱處理后，冷卻至室溫，制得待測樣品。