[發(fā)明專利]一種仿刺參整合素多克隆抗體、抗原蛋白及其制備方法

有效

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• 申請日: 2022-06-10
• 公開（公告）號: CN114907468B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王際輝;李娜;肖珊;王晗
• 申請（專利權(quán)）人: 東莞理工學(xué)院
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/13;C12N15/70;C12N15/66;C07K16/18;C12N15/11;C12R1/19
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11732
• 代理人: 劉曉靜

本發(fā)明提供了一種仿刺參整合素多克隆抗體、抗原蛋白及其制備方法，屬于抗體制備技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明成功得到了仿刺參整合素抗原蛋白，將其免疫小鼠后能夠成功得到仿刺參整合素多克隆抗體，克服了現(xiàn)有技術(shù)中缺少仿刺參整合素抗體的問題，為仿刺參的生物學(xué)研究提供有意義的工具和實驗支持。本發(fā)明還成功得到了仿刺參整合素抗原蛋白的編碼基因、重組表達載體，通過本發(fā)明提供的制備方法能夠制得仿刺參整合素抗原蛋白。本發(fā)明還提供了仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列，填補了相關(guān)研究的空白，通過本發(fā)明引物對能夠成功擴增出上述仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列，可用于仿刺參整合素的其他相關(guān)研究。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種仿刺參整合素多克隆抗體、抗原蛋白及其制備方法。

背景技術(shù)

整合素家族是細胞黏附分子中的一類，屬于跨膜糖蛋白，在維持組織細胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、參與細胞黏附反應(yīng)、介導(dǎo)細胞間信號傳導(dǎo)等方面發(fā)揮重要作用。整合素是由非共價鍵結(jié)合的α和β亞基組成的異質(zhì)二聚體，每個亞基都是I型跨膜蛋白，具有一個保守的結(jié)構(gòu)，包括一個較大的細胞外多結(jié)構(gòu)域部分、一個單通道跨膜區(qū)域和一個通常較短的細胞質(zhì)尾部，能夠與細胞外基質(zhì)蛋白結(jié)合，并與細胞內(nèi)信號和細胞骨架復(fù)合物結(jié)合，進行“由外向內(nèi)”和“由內(nèi)向外”的雙向信號傳導(dǎo)，在細胞外基質(zhì)蛋白和細胞內(nèi)分子之間進行信息交換。

哺乳動物中的整合素功能及相關(guān)調(diào)節(jié)機制有關(guān)研究已相對成熟，但是目前，針對仿刺參整合素蛋白水平的研究較少，尤其是對仿刺參整合素的抗體制備等研究目前還無相關(guān)報道，研究制備仿刺參整合素的抗體，將為仿刺參的生物學(xué)研究提供有意義的工具和實驗支持。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種仿刺參整合素多克隆抗體、抗原蛋白及其制備方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中缺少仿刺參整合素抗體的問題。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種仿刺參整合素抗原蛋白，所述仿刺參整合素抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

本發(fā)明還提供了編碼上述仿刺參整合素抗原蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

本發(fā)明還提供了一種仿刺參整合素抗原蛋白的重組表達載體，包括上述述基因和初始載體。

優(yōu)選的，所述初始載體為pColdⅡ，所述基因插入初始載體的NdeI和HindIII酶切位點之間。

本發(fā)明還提供了一種仿刺參整合素抗原蛋白的制備方法，包含如下步驟：

將上述重組表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌、表達，得到仿刺參整合素抗原蛋白。

本發(fā)明還提供了一種仿刺參整合素多克隆抗體，所述多克隆抗體是以上述仿刺參整合素抗原蛋白免疫小鼠后得到。

本發(fā)明還提供了一種仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列，如SEQ?ID?NO.3所示。

本發(fā)明還提供了一種擴增上述仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列的引物對，所述引物對的序列如SEQ?ID?NO.4～5所示。

本發(fā)明的技術(shù)效果和優(yōu)點：

本發(fā)明成功得到了仿刺參整合素抗原蛋白，將其免疫小鼠后能夠成功得到仿刺參整合素多克隆抗體，這將為仿刺參的生物學(xué)研究提供有意義的工具和實驗支持，并且，實驗過程中還成功得到了仿刺參整合素抗原蛋白的編碼基因、重組表達載體，通過本發(fā)明提供的制備方法能夠制得仿刺參整合素抗原蛋白。本發(fā)明還提供了仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列，填補了相關(guān)研究的空白，通過本發(fā)明引物對能夠成功擴增出上述仿刺參整合素βG基因編碼區(qū)全序列，可用于仿刺參整合素的其他相關(guān)研究。

附圖說明

圖1為氨基酸序列比對結(jié)果圖；

圖2為IPTG誘導(dǎo)重組蛋白表達結(jié)果圖；