[發(fā)明專(zhuān)利]用于靶向抑制三陰性乳腺癌siRNA聯(lián)合藥物的納米遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210634427.1 | 申請(qǐng)日： | 2022-06-07 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN115025045B | 公開(kāi)（公告）日： | 2023-03-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 方儀;郭磊 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 杭州博醫(yī)生物醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | A61K9/14 | 分類(lèi)號(hào)： | A61K9/14;A61K31/337;A61K31/704;A61K31/713;A61K47/26;A61P15/14;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11562 | 代理人： | 李彬 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市*** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 靶向 抑制 陰性 乳腺癌 sirna 聯(lián)合 藥物 納米 遞送 系統(tǒng) 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種納米遞送系統(tǒng)在制備三陰性乳腺癌靶向治療藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述納米遞送系統(tǒng)的制備方法，為如下步驟：
(1)4條DNA單鏈以相同濃度混合在TM緩沖液中，加熱至95℃保持10min，冷卻，形成四面體結(jié)構(gòu)TND；
(2)將OTUD6B siRNA與所述TND于37℃混合孵育，冷卻，得到Td-siRNA納米粒；所述OTUD6B siRNA為SEQ ID NO：1所示的正義鏈和SEQ ID NO：2所示的反義鏈；所述OTUD6BsiRNA與所述TND的摩爾比為1:1；
(3)將所述Td-siRNA與鹽酸阿霉素或紫杉醇混合孵育，即得終產(chǎn)物；
4條DNA單鏈序列為SEQ ID NO：3-6所示：
SEQ ID NO：3為：ATTTATCACCCGCCATAGTAGACGTATCACCAGGCAGTTGAGACGAACATTCCTAAGTCTGAA；
SEQ ID NO：4為：ACATGCGAGGGTCCAATACCGACGATTACAGCTTGCTACACGATTCAGACTTAGGAATGTTCG；
SEQ ID NO：5為：ACTACTATGGCGGGTGATAAAACGTGTAGCAAGCTGTAATCGACGGGAAGAGCATGCCCATCC；
SEQ ID NO：6為：CCCAGCCTTCCAGCTCCTTGATTTACGGTATTGGACCCTCGCATGACTCAACTGCCTGGTGATACGAGGATGGGCATGCTCTTCCCG；
步驟(1)中，所述TM緩沖液為以下組分：10mM Tris HCl和12.5mM MgCl2·6H2O，pH8.0；
步驟(1)中，冷卻條件具體為：冷卻至4℃保持20min；步驟(2)中，冷卻條件具體為冷卻至4℃保持1h；
所述鹽酸阿霉素或者紫杉醇與所述Td-siRNA的摩爾比為300:1。
2.一種用于靶向抑制三陰性乳腺癌的納米遞送系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，為如下步驟：
(1)4條DNA單鏈以相同濃度混合在TM緩沖液中，加熱至95℃保持10min，冷卻，形成四面體結(jié)構(gòu)TND；
(2)將OTUD6B siRNA與所述TND于37℃混合孵育，冷卻，得到Td-siRNA納米粒；所述OTUD6B siRNA為SEQ ID NO：1所示的正義鏈和SEQ ID NO：2所示的反義鏈；所述OTUD6BsiRNA與所述TND的摩爾比為1:1；
(3)將所述Td-siRNA與鹽酸阿霉素或紫杉醇混合孵育，即得終產(chǎn)物；
4條DNA單鏈序列為SEQ ID NO：3-6所示：
SEQ ID NO：3為：ATTTATCACCCGCCATAGTAGACGTATCACCAGGCAGTTGAGACGAACATTCCTAAGTCTGAA；
SEQ ID NO：4為：ACATGCGAGGGTCCAATACCGACGATTACAGCTTGCTACACGATTCAGACTTAGGAATGTTCG；
SEQ ID NO：5為：ACTACTATGGCGGGTGATAAAACGTGTAGCAAGCTGTAATCGACGGGAAGAGCATGCCCATCC；
SEQ ID NO：6為：CCCAGCCTTCCAGCTCCTTGATTTACGGTATTGGACCCTCGCATGACTCAACTGCCTGGTGATACGAGGATGGGCATGCTCTTCCCG；
步驟(1)中，所述TM緩沖液為以下組分：10mM Tris HCl和12.5mM MgCl2·6H2O，pH8.0；
步驟(1)中，冷卻條件具體為：冷卻至4℃保持20min；步驟(2)中，冷卻條件具體為冷卻至4℃保持1h；
所述鹽酸阿霉素或者紫杉醇與所述Td-siRNA的摩爾比為300:1。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，每條所述單鏈包含三個(gè)序列塊，每個(gè)序列塊與另外一條單鏈的序列互補(bǔ)，雜交，得到四個(gè)三角形的DNA螺旋，即形成所述的四面體結(jié)構(gòu)TND。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述TND的每條邊為20bp，每個(gè)頂點(diǎn)上有一個(gè)單一的寡核苷酸。
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