[發明專利]一種以跑臺為基礎評價小鼠學習記憶的行為學方法

有效

• 申請號: 202210620274.5
• 申請日: 2022-06-02
• 公開（公告）號: CN114847229B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發明（設計）人: 蘇強;楊銘萱;王卓然;張艷麗;李甜
• 申請（專利權）人: 山西醫科大學第一醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A01K15/02
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 茹牡花

本發明涉及一種以跑臺為基礎評價小鼠學習記憶的行為學方法。本發明技術方案包括參數設置、實驗步驟及小鼠學習記憶能力的評估三部分。本發明的技術方案是使用附有電刺激的多通道跑臺對小鼠進行跑步訓練，通過小鼠總被電擊次數及總電擊時間評估小鼠學習記憶能力。

技術領域

本發明涉及一種以跑臺為基礎評價小鼠學習記憶的行為學方法。

背景技術

各類野生型及轉基因動物是當前國內外開展藥理學、毒理學、病理學相關動物實驗的主要選擇，原因在于動物體實驗可有效反映干預后的整體效應，相較于離體實驗更能展現出活體動物精神、器官及細胞的功能效應，尤其是動物行為學實驗。動物行為學實驗主要是用來評價動物的溝通行為、情緒表達、社交行為、學習行為、繁殖等行為的主要方法。動物的行為往往容易受到外界干擾和動物自身器官、細胞的功能及心理因素的影響，因此，選擇一種可以有效反映動物行為的實驗方法和手段，是動物實驗研究可行性和可靠性中重要的環節。

小鼠的學習記憶行為實驗是目前評估小鼠學習記憶能力及精神行為狀態常用的實驗手段，也是開展研究和治療學習記憶功能障礙相關動物實驗的主要選擇。目前主流的評價學習記憶能力的小鼠行為學實驗主要包括Morris水迷宮實驗、條件恐懼實驗、電擊Y迷宮實驗、八臂迷宮實驗、T迷宮實驗等，其原理是利用小鼠畏水、趨暗避明、具有探索及覓食天性等習性，建立條件反射，從而反映小鼠學習記憶功能。小鼠學習記憶能力的評估廣泛應用于神經退行性疾病、腦血管疾病等神經、精神疾病的相關研究中，尤其是以學習記憶和認知缺失為主要臨床特征的阿爾茨海默病(Alzheimer’s?disease,AD)。然而，當前常用的小鼠學習記憶行為學評價方法多需長達數天的訓練期及測試期，且存在實驗裝置中每次只容許單只小鼠進行實驗的問題，當樣本量較大時訓練耗時耗力，操作繁瑣；并且多數行為學實驗高度依賴于攝像頭及動作軌跡捕捉系統的精密程度，而這些記錄設備往往價格高昂，且所需實驗條件較高，給動物實驗研究帶來一定的局限性。

小鼠跑臺是一種附有直流電刺激的多通道履帶式小鼠強迫跑步裝置，目前用于評估小鼠運動能力，或參與運動代謝的有關實驗。小鼠跑臺裝置主要由四個部分組成：(1)跑步帶部分，可逆時針轉動；(2)電刺激部分，位于跑步帶部分的尾端，通過給予小鼠足底電刺激強迫小鼠在跑步帶上向前運動；(3)控制臺部分，調節跑步帶轉動速度及電刺激的電流強度，并可實時記錄小鼠自跑步開始的累積電擊次數及累積電擊時間；(4)外殼部分，將跑步帶分隔成多個獨立的通道，可同時容納多只小鼠進行實驗。

發明內容

本發明的目的是提供一種應用跑臺評估小鼠學習記憶能力的行為學方法，以解決現有評估小鼠學習記憶能力的行為學實驗耗時繁瑣，費用高昂的技術問題。

本發明的技術方案是使用附有電刺激的多通道跑臺對小鼠進行跑步訓練，通過小鼠累積電擊次數及累積電擊時間評估小鼠學習記憶能力。

所述發明的技術方案包括參數設置、實驗步驟及小鼠學習記憶能力的評估三部分，具體如下：

(1)跑臺的參數設置：

A.將跑臺足底電刺激的電流設置為0.1A；

B.將跑臺跑步帶轉動速度設置為10cm/分鐘，勻速轉動；

(2)以跑臺為基礎評價小鼠學習記憶的行為學方法實驗步驟：

A.將多只小鼠分別放入跑臺的多個通道內，關閉通道的蓋子防止小鼠逃脫；

B.打開跑臺開關，使跑步帶根據設定的轉速逆時針轉動；

C.每5分鐘記錄一次每只小鼠自跑步開始的累積電擊次數及累積電擊時間；

D.使小鼠連續跑步40分鐘后關閉跑臺開關；

E.每組小鼠結束跑步訓練后移回原飼養籠，使用75％酒精清洗跑臺；

F.每只小鼠每天接受1次跑步訓練，連續實驗2天，每天的實驗步驟相同；