[發明專利]一株耐熱且高產蛋白酶的蠟狀芽孢桿菌SH-831及其應用

有效

• 申請號: 202210609343.2
• 申請日: 2022-05-31
• 公開（公告）號: CN115058355B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 沈宏;盧波斯;沈丁熠
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/54;C12P21/06;C12P13/06;C12P13/10;C12P13/08;C12P13/12;C12P13/14;C12P13/22;C12P13/04;C12P13/20;C12P13/24;C05F17/20;C12R1/085
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳娟

1.一株耐熱且高產蛋白酶的蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)SH-831，其特征在于，所述菌株于2022年4月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址為廣東省廣州市越秀區先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏編號為GDMCC?NO.62347。

2.權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831在制備蛋白酶中的應用。

3.一種制備蛋白酶的方法，其特征在于，包括如下步驟：將權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831接種于培養基中培養，離心，取上清液，即得含蛋白酶的粗酶液，其最高活性為871.2U/mL；

所述培養基由如下質量濃度的組分組成：脫脂奶粉5～10g/L，氯化鈉1～4g/L，磷酸氫二鉀0.1～1g/L。

4.根據權利要求3所述方法，其特征在于，所述培養基的pH為5～7；所述蠟狀芽孢桿菌SH-831的接種量為0.1％～1％；所述培養的溫度為28～55℃，時間為8～15h；所述培養為搖床培養，轉速為150～200r/min。

5.權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831在制備花生麩提取液、魚蛋白提取液或大豆提取液中的應用。

6.一種制備花生麩提取液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S11：將權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831接種于培養基中培養，得到SH-831菌液，備用；

所述培養基由如下質量濃度的組分組成：脫脂奶粉5～10g/L，氯化鈉1～4g/L，磷酸氫二鉀0.1～1g/L；所述培養基的pH為5～7；

S12：將花生麩粉劑分散于水中得花生麩懸濁液；

S13：調節花生麩懸濁液的pH為9.0～11.0，然后加入堿性蛋白酶降解，得到酶解花生麩產物；

S14：將S13酶解花生麩產物的pH調整為6.5～7.5，加入S11所得SH-831菌液、氯化鈉和磷酸氫二鉀，發酵，離心，即得所述花生麩提取液，產率可達47.8％。

7.根據權利要求6所述方法，其特征在于，S12中所述花生麩懸濁液的質量分數為10～15％；

S13中所述堿性蛋白酶的添加量為0.01～0.05％；所述降解的條件為120～180r/min，35-50℃條件下降解6～10h；

S14中所述SH-831菌液與花生麩懸濁液的質量比為0.005～0.01:1；所述氯化鈉的添加量為1～4g/L；所述磷酸氫二鉀的添加量為0.1～1g/L；所述發酵的溫度為26～35℃，時間為3～5d。

8.一種制備魚蛋白提取液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S21：將權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831接種于培養基中培養，得到SH-831菌液，備用；

所述培養基由如下質量濃度的組分組成：脫脂奶粉5～10g/L，氯化鈉1～4g/L，磷酸氫二鉀0.1～1g/L；所述培養基的pH為5～7；

S22：將魚粉劑分散于水中得魚粉懸濁液；

S23：向魚粉懸濁液中加入S21制得的SH-831菌液、氯化鈉和磷酸氫二鉀，發酵，離心，即得所述魚蛋白提取液；

S23中所述SH-831菌液與魚粉的質量比為0.005～0.01:1；所述氯化鈉的添加量為1～4g/L；所述磷酸氫二鉀的添加量為0.1～1g/L；所述發酵的溫度為26～35℃，時間為3～5d。

9.一種制備大豆提取液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S31：將權利要求1所述蠟狀芽孢桿菌SH-831接種于培養基中培養，得到SH-831菌液，備用；

所述培養基由如下質量濃度的組分組成：脫脂奶粉5～10g/L，氯化鈉1～4g/L，磷酸氫二鉀0.1～1g/L；所述培養基的pH為5～7；

S32：將脫脂大豆粉劑分散于水中得大豆懸濁液；

S33：向大豆懸濁液中加入S31所制得的SH-831菌液、氯化鈉和磷酸氫二鉀，發酵，離心，即得所述大豆提取液；

S33中所述SH-831菌液與脫脂大豆粉的質量比為0.005～0.01:1；所述氯化鈉的添加量為1～4g/L；所述磷酸氫二鉀的添加量為0.1～1g/L；所述發酵的溫度為26～35℃，時間為3～5d。