[發(fā)明專利]circRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210608147.3
• 申請(qǐng)日: 2022-05-31
• 公開（公告）號(hào): CN114908156A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白永懌;劉宏斌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第二醫(yī)學(xué)中心
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12N15/113;C12N15/11
• 代理公司: 北京領(lǐng)科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 徐丹丹;張丹

本發(fā)明提供一種診斷和/或預(yù)后評(píng)估血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病的circRNA及其應(yīng)用，所述circRNA為has_circ026271、has_circ026272和/或rno_circ_0017665。較健康個(gè)體相比，血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病個(gè)體外周血和/或組織的has_circ 026271、has_circ 026272和/或rno_circ_0017665顯著上調(diào)，通過(guò)檢測(cè)circRNA的表達(dá)量，可以準(zhǔn)確的診斷血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病或心血管疾病。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及用于血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病或心血管疾病診斷和/或預(yù)后評(píng)估的circRNA。

背景技術(shù)

血管重構(gòu)是血管為適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境變化而發(fā)生的結(jié)構(gòu)和功能改變。這個(gè)過(guò)程包括血管壁細(xì)胞的增生，肥大，凋亡，細(xì)胞遷移，細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生及降解等細(xì)胞生物學(xué)變化。血管重構(gòu)可分為肥厚性血管重構(gòu)與非肥厚性血管重構(gòu)，兩者以一定比例共存于同一血管上。非肥厚性血管重構(gòu)的主要特征是血管外徑明顯減少，內(nèi)徑明顯減少，中膜橫截面積不變，血管平滑肌細(xì)胞發(fā)生重排；肥厚性血管重構(gòu)的主要特征是內(nèi)徑明顯減少，中膜橫截面積增加，血管平滑肌細(xì)胞增生。血管重構(gòu)是肺動(dòng)脈高壓、原發(fā)性高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化等相關(guān)疾病惡化的重要病理基礎(chǔ)或也是此類疾病發(fā)生發(fā)展的重要病因，其發(fā)生隱匿，目前判斷主要依據(jù)超聲診斷。但是，如何在疾病發(fā)生之初，識(shí)別血管發(fā)生變化，對(duì)于逆轉(zhuǎn)或減輕血管重構(gòu)，保護(hù)靶器官，是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。

circRNA(circular RNA，環(huán)狀RNA)是一類由特殊剪切機(jī)制形成的、具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA)，通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)控在生理及病理過(guò)程中發(fā)揮作用。circRNA的組織特異性、疾病特異性、時(shí)序特異性及高穩(wěn)定性等特點(diǎn)使其成為潛在的臨床疾病的生物標(biāo)記物。目前關(guān)于circRNA作為生物標(biāo)志物在多種疾病中都得到了驗(yàn)證，尤其是癌癥領(lǐng)域，例如肺癌、乳腺癌等都已找出高靈敏度的circRNA指標(biāo)作為生物標(biāo)志物來(lái)輔助臨床診斷。近年來(lái)circRNA在疾病中的作用機(jī)制也成為研究熱點(diǎn)，使circRNA生物標(biāo)志物成為診斷、治療疾病靶點(diǎn)的關(guān)鍵分子，例如專利CN113278690A公開了環(huán)狀RNA circ-26782在制備脊髓損傷診療藥物中的應(yīng)用；專利CN113249478A公開了hsa_circ_0068464作為標(biāo)志物在制備結(jié)直腸癌診斷及預(yù)后藥物中的應(yīng)用。

非專利文獻(xiàn)(郭欣,范春雨.環(huán)狀RNA在心血管疾病中的研究現(xiàn)狀及展望[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志,2021,19(07):1118-1120；曾曉輝,盧帥,汪朝暉.心血管疾病中環(huán)狀RNA的研究現(xiàn)狀[J].河北醫(yī)藥,2021,43(18):2839-2843.)公開了hsa-circ-0005870、hsa_circ_0126991等可能成為診斷高血壓疾病的新型生物標(biāo)志物。

另外，非專利文獻(xiàn)：Dip2b基因在肺發(fā)育中的作用研究(楊安瀾，東北師范大學(xué)，2019)和非專利文獻(xiàn)：Dip2a與Dip2b的基因功能研究(班路瑩，東北師范大學(xué)，2016)公開了Dip2b基因是冠心病相關(guān)的超增強(qiáng)子(super enhancer)發(fā)生單核苷酸多態(tài)性變異(SNP)的位點(diǎn)之一，Dip2b基因通過(guò)調(diào)節(jié)shh基因和Wnt5a基因的表達(dá)水平調(diào)控肺的發(fā)育，在敲除Dip2b基因后，通過(guò)調(diào)控心臟發(fā)育相關(guān)通路導(dǎo)致心臟發(fā)育異常，并最終導(dǎo)致新生小鼠死亡。

但在Dip2b基因中轉(zhuǎn)錄出的circRNA與血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病或心血管疾病之間關(guān)系的研究未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于此，本發(fā)明提供一種在Dip2b基因中篩選出的可以用于診斷和/或預(yù)后評(píng)估血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病或心血管疾病的circRNA。本發(fā)明通過(guò)血管重構(gòu)大鼠circRNA表達(dá)譜篩選出多種表達(dá)變化的circRNAs，并在多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中得以驗(yàn)證，經(jīng)過(guò)種屬間序列比對(duì)與確認(rèn)，通過(guò)多種血管重構(gòu)或其相關(guān)疾病或心血管疾病臨床標(biāo)本確證，為臨床提供一種用于疾病診斷和/或預(yù)后評(píng)估的circRNA，建立相較于目前手段更加快速、靈敏度高的方法以應(yīng)用于臨床診斷，并為疾病提供潛在治療靶點(diǎn)。