[發明專利]一種水稻油體蛋白基因OsOle6及其編碼蛋白與應用

有效

• 申請號: 202210597877.8
• 申請日: 2022-05-30
• 公開（公告）號: CN114990134B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 張昌泉;李雪飛;劉巧泉;陸彥;黃李春;李錢峰;趙冬生;范曉磊;張林
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/84;C12N15/113;C12N15/55;C12N15/66;C07K14/415;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 許必元

1.敲除水稻油體蛋白基因OsOle6在培育脂肪酸含量降低的水稻品系中的應用，所述水稻油體蛋白基因OsOle6的核苷酸序列如SEQ?ID?No.?1所示。

2.根據權利要求1所述的應用，所述OsOle6編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.?2所示。

3.根據權利要求1或2所述的應用，敲除采用CRISPR/Cas9系統。

4.過量表達水稻體蛋白基因OsOle6在培育脂肪酸含量提高的水稻品系中的應用，所述水稻油體蛋白基因OsOle6的核苷酸序列如SEQ?ID?No.?1所示。

5.根據權利要求4所述的應用，所述OsOle6編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.?2所示。

6.根據權利要求4或5所述的應用，過量表達過程中所用的過量表達載體為Ubi-Ole6，所述Ubi-Ole6包含基因OsOle6，載體為植物表達載體pCAMBlA1300，其中包括來自水稻自身組成性高表達基因OsUbi的啟動子。

7.根據權利要求6所述的應用，過量表達載體Ubi-Ole6的制備方法如下：將經限制性內切酶BamHI和SalI切割線性化的攜帶有OsUbi啟動子的pCAMBlA1300-Ubi載體與包含OsOle6的PCR擴增產物進行混合，用ClonExpress?Ultra?One?Step?Cloning?Kit進行同源重組連接。

8.根據權利要求7所述的應用，PCR擴增引物序列如下：

primer3：5'TGTGTGTGCAGCCCGGGATCCATGGCTGATCAGCACAGAGGA3'；

primer4：5'CATCAATTGACGCGTGTCGACAGACGCCTGCGCCTG3'；primer3如SEQ?ID?NO.?5所示，primer4如SEQ?ID?NO.?6所示。