[發明專利]一種魔芋多倍體的快速誘導方法

有效

• 申請號: 202210564248.5
• 申請日: 2022-05-23
• 公開（公告）號: CN114831025B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 蔡陽光;段龍飛;覃劍鋒;張百忍;郭邦利;陳國愛;楊涼花;劉次鵬;王宗方
• 申請（專利權）人: 安康市農業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

1.一種魔芋多倍體的快速誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、選取不同時期的實生籽做誘導材料，對誘導材料進行清洗消毒處理；

S2、對處理后的誘導材料進行初代培養，得到初代培養物；

S3、使用誘變劑對初代培養物進行誘變，得到誘變產物；

S4、對誘變產物進行二代培養，得到幼苗；

S5、幼苗培養后得到原原種；

所述不同時期的實生籽為未成熟的實生籽或成熟的實生籽；

當對未成熟的實生籽進行初代培養時，所述初代培養物為愈傷組織，對成熟的實生籽進行初代培養時，所述初代培養物為催芽后的種子；

所述誘導材料為未成熟的實生籽時，誘導的具體方法包括以下步驟：

S1、對實生籽清洗消毒處理后，進行初代培養；

初代培養為：取實生籽的幼胚接于愈傷誘導培養基上培養得到愈傷組織；

所述愈傷誘導培養基以MS為基礎培養基，每升MS培養基中添加1.0-2.0mg?6-BA、0.1-0.2mg?KT、0.1-0.2mg?2，4-D和30g蔗糖；

S2、向愈傷繼代培養基內添加誘變劑，混勻得到誘變培養基，將愈傷組織接于誘變培養基上進行誘變，得到誘變產物；

所述愈傷繼代培養基以MS為基礎培養基，每升MS培養基中添加0.5-1.0mg?6-BA或0.1-0.2mg?KT、0.1-0.2mg?NAA和30g蔗糖；

所述誘變劑為質量分數為0.05%-0.1%的秋水仙素和質量分數為0.1%-0.2%的二甲基亞砜溶液的混合溶液；

S3、對誘變產物進行二代培養，包括對誘變產物處理得到叢生芽，對叢生芽處理得到幼苗；

所述二代培養的具體過程為：

S1、將誘變產物接入誘導芽分化培養基，培養得到叢生芽；

所述誘導芽分化培養基以MS為基礎培養基，每升MS中添加2.0-4.0mg?6-BA、0.5-1.0mgKT、0.1-0.2mg?NAA、20g蔗糖，誘導芽分化培養基的pH為5.8-6.0；

S2、將叢生芽接入繼代培養基，誘導出根原基；

所述繼代培養基以MS為基礎培養基，每升MS中添加0.5-1.0mg?6-BA、0.5-1.0mg?NAA、20g蔗糖，繼代培養基的pH為5.8-6.0；

S3、將誘導出根原基的單芽轉接進誘導幼苗分化培養基，即可分化出幼苗；

所述誘導幼苗分化培養基以1/2MS為基礎培養基，每升1/2MS中添加1.0-2.0mg?KT、0.2-0.5mg?6-BA、1.0-1.5mg?NAA和20g蔗糖，誘導幼苗分化培養基的pH為5.8-6.0；

所述誘導材料為成熟的實生籽時，誘導的具體方法包括以下步驟：

S1、對實生籽進行清洗、破除休眠、消毒、初代培養，得到催芽后的種子；

所述破除休眠：將實生種子浸泡在每升溶液中含有10-20mg?KT、500-800mg?GA3、5-10mg?2，4-D的混合溶液中，浸泡一定時間后取出清洗，晾干；

所述初代培養：將種子在溫度25-28℃，濕度60%-70%，濕潤的條件下進行催芽；

S2、使用誘變劑對催芽后的種子進行誘變，得到誘變產物；

所述誘變劑為質量分數為0.005%-0.008%的氨氟樂靈與0.01-0.03mol/L的二甲基戊靈的混合溶液；

S3、對誘變產物進行二代培養，具體為將誘變產物接于繼代培養基中誘導芽生長分化，培養得到幼苗；

所述繼代培養基以MS為基礎培養基，每升MS中添加1.0-2.0mg?KT、0.2-0.5mg?6-BA、1.0-1.5mg?NAA和20g蔗糖。

2.根據權利要求1所述的一種魔芋多倍體的快速誘導方法，其特征在于，所述誘導材料為未成熟的實生籽時，S1中，初代培養的條件為：溫度25-28℃，濕度30%-40%，暗培養15-18天；S2中，誘變的條件為暗培養7-10天，溫度25-28℃，濕度30%-40%。

3.根據權利要求1所述的一種魔芋多倍體的快速誘導方法，其特征在于，所述誘導材料為未成熟的實生籽時，所述愈傷誘導培養基的pH和所述愈傷繼代培養基的pH均為5.8-6.0。