[發(fā)明專利]一種核桃青皮抗腫瘤活性蛋白及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210555603.2 | 申請(qǐng)日: | 2022-05-20 |
| 公開(公告)號(hào): | CN114752585B | 公開(公告)日: | 2023-07-18 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 宋莉;韓斯宇 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 山西大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N9/42 | 分類號(hào): | C12N9/42;A61K38/47;A61P35/00 |
| 代理公司: | 太原申立德知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 程園園 |
| 地址: | 030006*** | 國(guó)省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 核桃 青皮 腫瘤 活性 蛋白 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種核桃青皮抗腫瘤活性蛋白,其特征在于:所述抗腫瘤活性蛋白是以核桃青皮為原料提取到的分子量為66~90kDa的蛋白,SDS-PAGE凝膠電泳顯示是單一條帶;
所述抗腫瘤活性蛋白的制備方法包括以下步驟:
步驟1,取核桃青皮,陰干;
步驟2,取陰干后的核桃青皮,剪碎后,按每克加4~6mL的蛋白提取液,4℃下浸泡10~16h,離心后,取上清液;所述蛋白提取液為pH7.4的磷酸緩沖液;
步驟3,在步驟2的上清液中加入2~3倍體積-20℃提前預(yù)冷的丙酮,靜置0.5~1.5h后,4℃離心收集沉淀,在-20℃下放置20~40min,得到沉淀為核桃青皮粗蛋白;
步驟4,將步驟3得到的沉淀用磷酸緩沖液溶解,離心后取上清液;
步驟5,將活性炭以8~12g/L加入到步驟4的上清液中,連續(xù)攪拌5min,靜置20~40min吸附色素,過濾后得到純化后的核桃青皮抗腫瘤活性蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核桃青皮抗腫瘤活性蛋白,其特征在于:所述步驟2中核桃青皮與蛋白提取液的質(zhì)量體積比為1:4,單位為g/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核桃青皮抗腫瘤活性蛋白,其特征在于:所述步驟2、3、4和5均在0~4℃條件下進(jìn)行。
4.一種權(quán)利要求1所述的核桃青皮抗腫瘤活性蛋白的應(yīng)用,其特征在于:用于制備抗肝癌、大腸癌、乳腺癌、宮頸癌以及卵巢腺癌的藥物。
5.一種含有權(quán)利要求1所述的核桃青皮抗腫瘤活性蛋白的藥物組合物。
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