[發(fā)明專利]一組用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物、應(yīng)用及篩選方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210548206.2
• 申請(qǐng)日: 2022-05-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115128278A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉蘇;洪玲;刁梁輝;黃春宇;王雪金;肖珊;張宏展;熊風(fēng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳中山泌尿外科醫(yī)院;深圳市錦欣醫(yī)療科技創(chuàng)新中心有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/573;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 李昆蔚

1.一組用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物，其特征在于，所述生物標(biāo)志物為多種卵泡液差異蛋白，所述卵泡液差異蛋白包括上調(diào)蛋白和下調(diào)蛋白；

所述上調(diào)蛋白在優(yōu)質(zhì)胚胎率高的PCOS人群中的表達(dá)量與其在優(yōu)質(zhì)胚胎率低的PCOS人群中的表達(dá)量的比值大于或等于1.2；

所述下調(diào)蛋白在所述優(yōu)質(zhì)胚胎率高的PCOS人群中的表達(dá)量與其在所述優(yōu)質(zhì)胚胎率低的PCOS人群中的表達(dá)量的比值小于或等于0.83。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一組用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物，其特征在于，所述上調(diào)蛋白包括白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體成員1、巨噬細(xì)胞集落刺激因子、酪氨酸蛋白激酶ITK/TSK、卷曲卷結(jié)構(gòu)域蛋白126、4F2細(xì)胞表面抗原重鏈、磷脂酰轉(zhuǎn)移蛋白、血栓反應(yīng)蛋白-4、凝血因子VII、補(bǔ)體成分C8伽馬鏈、β-丙氨酸二肽酶、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白、載脂蛋白A-II、蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一組用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物，其特征在于，所述下調(diào)蛋白包括富含組氨酸糖蛋白、神經(jīng)細(xì)胞黏附分子1、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活因子、免疫球蛋白重變構(gòu)3-7、低氧上調(diào)蛋白1、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白Bip、甘露糖低聚糖1,2,-α-甘露糖苷酶IC、免疫球蛋白卡帕變構(gòu)2-30、海綿蛋白-1、轉(zhuǎn)膜蛋白198、霍納蛋白、Nesh-SH3靶標(biāo)蛋白、免疫球蛋白重變構(gòu)3-72、E3泛素蛋白連接酶中的至少一種。

4.如權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的一組生物標(biāo)志物在評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率中的應(yīng)用。

5.一種用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有如權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有4～5種所述上調(diào)蛋白和/或所述下調(diào)蛋白。

7.一種如權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、分別采集所述優(yōu)質(zhì)胚胎率高的PCOS人群的卵泡液和所述優(yōu)質(zhì)胚胎率低的PCOS人群的卵泡液；

S2、將采集到的兩組人群的卵泡液分別進(jìn)行非標(biāo)記蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)分析；

所述非標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)分析的過(guò)程為，先提取卵泡液中的蛋白質(zhì)，再對(duì)得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行酶解得到肽段，再對(duì)肽段進(jìn)行質(zhì)譜分析；

S3、對(duì)步驟S2得到的質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，篩選出在兩組人群的卵泡液中具有顯著的差異表達(dá)的蛋白，即得到所述用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物；

其中，篩選的標(biāo)準(zhǔn)為，蛋白質(zhì)在所述優(yōu)質(zhì)胚胎率高的PCOS人群中的表達(dá)量和所述優(yōu)質(zhì)胚胎率低的PCOS人群中的表達(dá)量的組間比值≥1.2，或組間比值≤0.83。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述一種用于評(píng)估PCOS人群優(yōu)質(zhì)胚胎率的生物標(biāo)志物的篩選方法，其特征在于，

所述優(yōu)質(zhì)胚胎率高的PCOS人群為D3優(yōu)質(zhì)胚胎率大于70％；所述優(yōu)質(zhì)胚胎率低的PCOS人群為D3優(yōu)質(zhì)胚胎率小于30％；

所述D3優(yōu)質(zhì)胚胎率的計(jì)算方法為，(D3優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)/受精數(shù))×100％；

所述D3優(yōu)質(zhì)胚胎為，來(lái)源于正常受精卵、且受精后第3天胚胎細(xì)胞數(shù)為7-9個(gè)、細(xì)胞大小符合發(fā)育階段、碎片程度小于10％、無(wú)多核化的胚胎。