[發(fā)明專利]WDR67抑制劑及其在抑制肝癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210544798.0
• 申請(qǐng)日: 2022-05-19
• 公開（公告）號(hào): CN114917344B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周鋼橋;曹鵬博;陳紅霞;張瑩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A61K45/00
• 分類號(hào): A61K45/00;A61K45/06;A61P35/00;A61P35/04;C12Q1/6886;C12N15/867;C12N15/113
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 董函竹

本發(fā)明公開了WDR67抑制劑及其在抑制肝癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用。具體地公開了WDR67抑制劑在制備治療或預(yù)防肝癌的藥物中的應(yīng)用，所述WDR67抑制劑可為抑制WDR67基因表達(dá)、沉默或敲除WDR67基因的物質(zhì)，和/或，抑制WDR67蛋白含量和/或活性的物質(zhì)。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)通過降低WDR67基因的表達(dá)或活性可以顯著地抑制肝癌細(xì)胞的生長，根據(jù)RNAi原理，通過設(shè)計(jì)短發(fā)卡RNA(shRNA)序列，將其克隆到慢病毒載體載體中包裝成慢病毒感染肝癌細(xì)胞構(gòu)建了穩(wěn)定敲低WDR67基因的肝癌細(xì)胞株，體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明，敲低WDR67會(huì)顯著抑制肝癌細(xì)胞的生長，并對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖和遷移具有很強(qiáng)的抑制作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及WDR67抑制劑及其在抑制肝癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝癌(Primary?liver?cancer，PLC)是指發(fā)生于肝細(xì)胞和肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的癌，是一種死亡率較高的惡性腫瘤。肝細(xì)胞癌(Hepatocellular?carcinoma，HCC；以下簡稱肝癌)起源于肝臟上皮細(xì)胞(即肝細(xì)胞)，約占PLC的90％，具有起病隱匿，治療效果差和預(yù)后惡劣的特點(diǎn)。解析肝癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制對(duì)肝癌的早期診斷及制定新的治療策略具有十分重要的意義。

表皮生長因子受體(Epidergrowth?factor?receptor，EGFR)是受體酪氨酸激酶(Receptor?tyrosine?kinases，RTK)家族成員之一，已被證明在細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。大規(guī)模的基因組研究表明，在多種類型的癌癥中，EGFR常因基因組變異而受到激活。相比之下，肝癌患者中只有不到5％的個(gè)體攜有致瘤性EGFR突變或拷貝數(shù)擴(kuò)增。然而，EGFR蛋白在60％的肝癌患者腫瘤中普遍高表達(dá)，并與腫瘤的侵襲性密切相關(guān)。這種不一致性表明在肝癌中存在替代機(jī)制來解釋EGFR蛋白異常高表達(dá)。越來越多的證據(jù)表明，RabGTPases介導(dǎo)的EGFR內(nèi)吞及胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)異常是調(diào)節(jié)EGFR表達(dá)和活性的一種新機(jī)制。然而，在肝癌細(xì)胞中，EGFR異常的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)仍然未得到全面解析。因此鑒定可靶向參與調(diào)控EGFR異常轉(zhuǎn)運(yùn)和激活的TBC-Rab信號(hào)軸可作為抗腫瘤藥物篩選的一個(gè)重要切入點(diǎn)。

本發(fā)明利用了從超過800名肝癌患者中收集的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)集，通過生物信息學(xué)分析，鑒定發(fā)現(xiàn)了15個(gè)與肝癌相關(guān)的顯著體細(xì)胞拷貝數(shù)變異(Copy?number?alteration，CNA)。其中，染色體8q24.13區(qū)域的拷貝數(shù)擴(kuò)增與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)。結(jié)合高內(nèi)涵功能篩查和后續(xù)功能分析，發(fā)現(xiàn)位于該擴(kuò)增區(qū)域的WDR67是一種新的癌基因。機(jī)制上，WDR67可以水解Rab22A，將GTP形式的Rab22A水解為無轉(zhuǎn)運(yùn)活性的GDP形式的Rab22A，延遲其介導(dǎo)的EGFR從早期胞內(nèi)體轉(zhuǎn)運(yùn)至溶酶體的過程，從而持續(xù)激活EGFR信號(hào)通路，促進(jìn)肝癌生長和轉(zhuǎn)移。綜上，靶向WDR67的策略可以通過抑制肝癌細(xì)胞中的EGFR活性實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的抑制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種WDR67抑制劑在制備治療或預(yù)防肝癌的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題不限于所描述的技術(shù)主題，本領(lǐng)域技術(shù)人員通過以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技術(shù)主題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明首先提供了WDR67抑制劑在制備治療或預(yù)防肝癌的藥物中的應(yīng)用。

上述應(yīng)用中，所述治療或預(yù)防肝癌的藥物可具有下述至少一種功能：

A1)抑制肝癌細(xì)胞生長或增殖；

A2)抑制肝癌細(xì)胞侵襲和/或遷移；

A3)抑制肝癌細(xì)胞的成瘤能力；

A4)抑制依賴于Rab22A的GTP水解酶活性；

A5)在肝癌細(xì)胞中抑制EGFR信號(hào)通路的活性，并特異抑制其下游的MEK-ERK通路和PI3K-AKT通路；

A6)降低肝癌細(xì)胞對(duì)MEK抑制劑的耐藥性。