[發明專利]蛋白FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌致病力中的應用

有效

• 申請號: 202210542266.3
• 申請日: 2022-05-18
• 公開（公告）號: CN114773440B
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: 李云鋒;聶燕芳;趙雅麗;鄢甜甜;張炎至;李華平
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07K14/37
• 分類號: C07K14/37;C12N15/31;C12N1/15;C12Q1/6895;A01N57/16;A01P3/00;C12R1/77
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗

本發明公開一種蛋白FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌致病力中的應用，屬于植物基因工程領域。本發明通過構建基因敲除載體，將其導入Foc4原生質體；利用同源重組方法將該基因從Foc4中敲除，獲得敲除突變體ΔFoUpe2；通過構建基因回補載體，將其導入ΔFoUpe2原生質體；利用隨機插入的方法將該基因回補到敲除突變體中，獲得回補突變體ΔFoUpe2?com。與Foc4相比，ΔFoUpe2對SDS脅迫的敏感性顯著升高；致病性試驗表明，FoUpe2的缺失使Foc4的致病力顯著升高；將該基因回補后，其致病力得到恢復。我們的研究有助于深入闡明香蕉枯萎病菌的致病分子機制，為開發有效殺菌劑提供了靶標基因。

技術領域

本發明屬于植物基因工程領域，特別涉及一種香蕉枯萎病菌未知蛋白(Uncharacterized?protein)FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌致病力中的應用。

背景技術

香蕉枯萎病(Fusarium?wilt?of?banana，FWB)，又稱為巴拿馬病(Panamadisease)或香蕉黃葉病，是由尖孢鐮刀菌古巴專化型(Fusarium?oxysporumf.sp.cubense,Foc)所引致的一種具有毀滅性的土傳病害，嚴重威脅著全球香蕉產業的發展。分泌蛋白是Foc的重要致病因子，但目前對于大部分Foc分泌蛋白的功能并不清楚。

FoUpe2(Uncharacterized?protein)是一個未知蛋白，不含已知結構域，在鐮刀菌中具有高度保守性。關于FoUpe2在香蕉枯萎病菌中的具體功能尚不清楚。本專利有助于全面了解Foc4效應蛋白的組成與功能，為進一步豐富Foc4的致病分子機理提供理論基礎。

發明內容

為了克服現有技術的缺點與不足，本發明的目的在于提供一種蛋白FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌致病力中的應用。

本發明的目的是公開一種香蕉枯萎病菌基因FoUpe2及其編碼蛋白FoUpe2的新功能。基因FoUpe2為SEQ?ID?NO：1中第1位至第441位所示的核苷酸序列，其所編碼的蛋白FoUpe2為SEQ?ID?NO：2所示的蛋白質。本發明通過構建基因敲除載體，將其導入Foc4原生質體；利用PEG介導的同源重組方法將該基因從Foc4中敲除，最終獲得了敲除突變體ΔFoUpe2；通過構建基因回補載體，將其導入ΔFoUpe2原生質體；利用隨機插入的方法將該基因回補到敲除突變體中，最終獲得了回補突變體ΔFoUpe2-com。ΔFoUpe2在應對SDS脅迫上存在缺陷。致病性測定表明，敲除突變體ΔFoUpe2致病性顯著升高，回補突變體ΔFoUpe2-com的致病性則恢復到野生型Foc4水平。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

本發明提供一種蛋白FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌致病力中的應用。

進一步的，所述的蛋白FoUpe2在調控香蕉枯萎病菌抗脅迫中的應用。

優選的，所述的脅迫為SDS脅迫。

本發明提供一種蛋白FoUpe2在香蕉抗病品種選育和抗病性鑒定中的應用。

本發明提供一種蛋白FoUpe2在篩選和/或鑒定香蕉枯萎病菌拮抗菌中的應用。

一種提高香蕉枯萎病菌致病力的方法，所述方法是通過使香蕉枯萎病菌的編碼蛋白FoUpe2的基因功能缺失或下調，來提高香蕉枯萎病菌的致病力。

所述的編碼蛋白FoUpe2的基因功能下調為通過RNA干涉技術(RNAi)或者基因組編輯技術(CRISPR-Cas)來下調香蕉枯萎病菌內的FoUpe2活性，達到提高致病力的目的。

本發明提供一種蛋白FoUpe2在防治由香蕉枯萎病菌導致的香蕉枯萎病中的應用，所述的防治是通過過表達編碼蛋白FoUpe2的基因實現的。

本發明提供一種蛋白FoUpe2作為用于植物病害防治的藥物的靶標的應用，所述的植物病害是由香蕉枯萎病菌導致的香蕉枯萎病。