[發明專利]GPX4蛋白靶向降解嵌合體及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202210534055.5
• 申請日: 2022-05-17
• 公開（公告）號: CN114957231A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 葛璟燕;胡詩琪;朱立權
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07D409/14
• 分類號: C07D409/14;A61K31/454;A61P35/00;A61P25/16
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 李世玉

1.一種式(Ⅰ)所示GPX4蛋白靶向降解嵌合體，

式(Ⅰ)中，R為C2-C11的直鏈烷基或烷氧基。

2.如權利要求1所述的GPX4蛋白靶向降解嵌合體，其特征在于，所述式(Ⅰ)所示GPX4蛋白靶向降解嵌合體為下列之一：

3.一種權利要求1所述GPX4蛋白靶向降解嵌合體的制備方法，其特征在于所述方法按如下步驟進行：

(1)式(4)所示化合物的合成：將N,N-二異丙基乙胺加入N,N-二甲基甲酰胺中，再加入式(3)所示化合物和式(9)所示化合物，將混合物在90℃下攪拌反應8h后，冷卻至25℃；用乙酸乙酯稀釋，依次水和飽和氯化鈉水溶液各洗滌1次，硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，獲得濃縮物；將濃縮物用體積比8:1的二氯甲烷：甲醇溶解后通過硅膠柱層析分離，用體積比1:5的乙酸乙酯/石油醚混合液為洗脫劑，洗脫速度為0.5mL/s，采用薄層色譜跟蹤檢測，以體積比1：2的乙酸乙酯：石油醚為展開劑，收集Rf值為0.25-0.4的組分，減壓蒸餾至無液體流出，然后再25℃真空干燥，得到式(4)所示化合物，記為中間體4；

(2)式(5)所示化合物的合成：在鹽酸濃度為4.0M的1,4-二氧六環溶液中加入中間體4，混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后加入乙醚沉淀，析出黃色固體，過濾，濾餅用乙醚洗滌后，于25℃真空干燥，得到式(5)所示化合物，記為中間體5；

(3)式(I)所示蛋白靶向降解嵌合體的合成：將中間體5和式(7)所示2-噻吩甲醛溶解在甲醇a中，加入DMF使其完全溶解，25℃活化1h后，加入式(6)所示芐異腈、式(8)所示氯甲酸和甲醇b的混合溶液，室溫攪拌過夜；反應液用乙酸乙酯稀釋，依次用水和飽和氯化鈉水溶液各洗滌1次，硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，取濃縮物用體積比8:1的二氯甲烷：甲醇溶解后通過硅膠柱層析，以體積比1:2的乙酸乙酯/石油醚混合溶劑為洗脫劑，流速0.5mL/s，以體積比1：1的乙酸乙酯：石油醚為展開劑進行薄層色譜監測，收集Rf值為0.25-0.4的流出液，25℃干燥，得到式(I)所示GPX4蛋白靶向降解嵌合體；

式(9)中R為C2-C11的直鏈烷基或烷氧基，更優選為乙烷、己烷、3,6-二氧雜辛烷、3,6,9-三氧雜十一烷；式(I)、(4)、(5)中R同式(9)中R。

4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述式(3)所示化合物與式(9)所示化合物投料物質的量之比為1：1-1.5；所述式(3)所示化合物與N,N-二異丙基乙胺投料物質的量之比為1：2-4；所述N,N-二甲基甲酰胺體積用量以式(3)所示化合物物質的量計為2-5mL/mmol；所述稀釋用乙酸乙酯體積用量以式(3)所示化合物物質的量計為40-80mL/mmol。

5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述1,4-二氧六環溶液體積用以中間體4物質的量計為1-5mL/mmol。

6.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述中間體5與2-噻吩甲醛、芐異腈和氯甲酸的投料物質的量之比均為1:1-2；所述甲醇a體積用量以中間體5物質的量計為10-60mL/mmol；所述N,N-二甲基甲酰胺體積用量以中間體5物質的量計為40-100mL/mmol；所述甲醇b體積用量以中間體5物質的量計為40-100mL/mmol；所述乙酸乙酯體積用量以中間體5物質的量計為100-200mL/mmol。

7.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中式(3)所示化合物按如下步驟制備：將乙酸鈉加入乙酸中，再加入式(1)所示3-氨基-2,6-哌啶二酮和式(2)所示3-氟酞酐，混合物在90℃下攪拌反應8h，然后冷卻至室溫；反應液用二氯甲烷稀釋，依次用水和飽和氯化鈉水溶液各洗滌1次，硫酸鈉干燥，過濾，濾液旋轉蒸發至干，得到式(3)所示化合物2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟基-異吲哚-1,3-二酮；所述3-氟酞酐與乙酸鈉投料物質的量之比為1:1-5；所述3-氟酞酐與3-氨基-2,6-哌啶二酮投料物質的量之比為1:0.9-2；