[發(fā)明專利]用于BCR/TCR基因重排檢測的試劑盒和裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210532220.3
• 申請日: 2022-05-17
• 公開（公告）號: CN114657254B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王維鋒;蔡佳程;張科;武海燕;鄭新;李鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 至本醫(yī)療科技（上海）有限公司;上海至本醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;至本醫(yī)療科技（重慶）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/686;C40B50/06;C12N15/11;G16B30/00
• 代理公司: 華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 陳春渠

1.一種用于BCR/TCR基因重排檢測的引物組合產(chǎn)品，其特征在于，包括：用于檢測BCR基因重排的引物和/或用于檢測TCR基因重排的引物；

所述用于檢測BCR基因重排的引物包括用于檢測IGH-VDJ重排、IGH-DJ重排、IGK-VJ重排、IGK-V-KDE重排、IGK-intronRSS-KDE重排、IGL-VJ重排、BCL1-IGH重排以及BCL2-IGH重排的引物組合物；

所述用于檢測TCR基因重排的引物包括用于檢測TRB-VDJ重排和TRG-VJ重排的引物組合物；

其中，用于檢測IGH-VDJ重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：1-22所示的上游引物，以及如SEQ ID NO：23-26所示的下游引物；

用于檢測IGH-DJ重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：27-34所示的上游引物，以及如SEQ ID NO：23-26所示的下游引物；

用于檢測IGK-VJ重排、IGK-V-KDE重排和IGK-intronRSS-KDE重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：35-46所示的上游引物，以及如SEQ ID NO：47-50所示的下游引物；

用于檢測IGL-VJ重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：51-52所示的上游引物序列，以及如SEQ ID NO：53所示的下游引物；

用于檢測BCL1-IGH重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：54所示的上游引物，以及如SEQ ID NO：55所示的下游引物；

用于檢測BCL2-IGH重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：56-64所示的上游引物，以及包括如SEQ ID NO：55所示的下游引物；

用于TRB-VDJ重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：65-116所示的上游引物，以及如SEQID NO：117-129所示的下游引物；

用于TRG-VJ重排的引物組合物包括如SEQ ID NO：130-135所示的上游引物，以及如SEQID NO：136-139所示的下游引物；

所述引物組合產(chǎn)品還包括內(nèi)參引物，所述內(nèi)參引物擴增的目的片段位于內(nèi)參基因上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合產(chǎn)品，其特征在于，所述內(nèi)參引物擴增的目的片段位于內(nèi)參基因ACTB上。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的引物組合產(chǎn)品，其特征在于，所述內(nèi)參引物包括如SEQ ID NO：140所示的上游引物，以及如SEQ ID NO：141所示的下游引物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項所述的引物組合產(chǎn)品，其特征在于，所述引物組合產(chǎn)品還包括測序接頭，所述測序接頭的核苷酸序列包括如SEQ ID NO：142所示的上游引物固定序列，以及如SEQ ID NO：143所示的下游引物固定序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的引物組合產(chǎn)品，其特征在于，所述測序接頭還包括第一標(biāo)簽序列和第二標(biāo)簽序列，所述上游引物固定序列連接有第一標(biāo)簽序列，所述下游引物固定序列連接有第二標(biāo)簽序列。

6.一種含有權(quán)利要求1~5任一項所述的引物組合產(chǎn)品的試劑盒。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR擴增試劑，所述PCR擴增試劑包括擴增酶、擴增緩沖液以及無核酸酶水中的至少一種。

8.一種用于BCR/TCR基因重排檢測的測序文庫建庫方法，其特征在于，包括：

采用權(quán)利要求1~5任一項所述的引物組合產(chǎn)品或權(quán)利要求6或7所述的試劑盒，對受試者的DNA進(jìn)行多重PCR擴增，構(gòu)建用于BCR/TCR基因重排檢測的高通量測序文庫。